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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
393
- 英文名:
Streptavidin
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
1ml/10ml/100ml
特别提示:包括300nm链霉亲和素磁珠在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:300nm链霉亲和素磁珠
英文名称:Streptavidin
产品货号:CZ015
产品规格:1ml/10ml/100ml
产品简介:
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
结合生物素化分子操作流程(本操作以适用于链霉亲和素磁珠系列所有产品,详见产品列表):
1. 使用前准备
1.1 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH
1.2 Buffer I(适用于结合生物素化核酸):10 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM EDTA,1 M NaCl,0.01%~0.1% Tween-20
1.3 Buffer II(适用于结合生物素化抗体/蛋白):PBS,pH 7.4,含0.05% Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.4 磁性分离器:可选用磁性分离器,Cat.No.60201,适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.5 漩涡振荡器
1.6 旋转混合仪
1.7 移液器及吸头
1.8 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心 管置于磁性分离器上,静置1 min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
2.2. 加入1 mL Buffer I到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤2.1取用磁珠体积大于1 mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为2 mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤 2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度,计算结合到磁珠上的核酸量﹝(反应前浓度-反应后浓度)×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白操作流程
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
3.2 加入1 mL Buffer II到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤3.1取用磁珠体积大于1 mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2” 两次,共洗涤三次。
3.4 加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1 mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求,加入Buffer II或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
注意事项:
1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2. 为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1 min。
3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍,以使磁珠饱和。
7. 本产品仅供研究使用。
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