链霉亲和素磁珠 RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应链霉亲和素磁珠 RNA纯化，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：链霉亲和素磁珠 RNA纯化
英文名：Magnetic beads binding with streptavidin
规格：2mL
编号：BTN130521
品牌：百奥莱博
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物，如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一，因此，这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合，而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合，而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性，捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。

产品特点：
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化，更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度：1%磁珠含量；
 固相载体：超顺磁性硅基磁珠；
 磁珠粒径：1μm；
 pH耐受范围：2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠)：﹥3000pmol游离生物素；﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸；﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液：10mM PBS，0.1% BSA，0.05% sodiu*(代"m") azide，0.1% Tween20。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液，用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中，通过磁力架磁分离后弃上清。
 注：磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次，以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品，室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长)，置于磁力架上进行磁分离，弃上清，并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速，且结合后不受pH，温度，有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素，与偶联复合物的生物素数据有明显差异)，用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表：

 

洗脱温度和时间	洗脱溶液	洗脱效率
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
90℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
90℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
65℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
65℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	97.9%
37℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	41.9%
90℃ for 10min	H2O	7.3%
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2	52.0%
90℃ for 10min	95%甲酰胺	35.9%
90℃ for 10min	30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.5%
90℃ for 10min	80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	97.3%
90℃ for 10min	140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.4%

使用举例：
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中，加入无菌去离子水至终体积为500μl(注：总RNA 量可低至50μg，但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到，需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中，温和混匀，室温放置至完全冷却，这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠：将链霉亲和素磁珠充分混匀后，取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内，放在磁力架上，待磁液分离后，移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠，放在磁力架上磁液分离，移除上清，重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min，期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠，小心移除上清，过程中不要触碰到磁珠，该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠，然后置于磁力架上分离磁珠，磁液分离后小心移除上清，重复三次，最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液)，温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠，将上清转移到一个新的无RNase的离心管内，不要触碰到磁珠(注：如果在转移过程中将磁珠悬起，可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。

链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠：链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性，故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
 注：在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS，IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀，置于磁力架上分离磁珠，去除上清，该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠，放于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复洗两次。PBS 重悬磁珠，使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内，室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态，以达到好的结合效率。反应结束后，置于磁力架上，磁液分离后，用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注：该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠，置于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。

链霉亲和素磁珠 RNA纯化正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN80201
英文名称：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点：
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面)，从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触，从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术，操作快捷，只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高，一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成：

成分	规格
菌体内毒素清除剂	200ml
溶液A	50ml
吸附柱活化液	25ml
离心吸附柱(小提)	50只
离心吸附柱(小提)套管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂，温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次，得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。

二：一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡30秒裂解细菌，直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法，故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱：在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化，质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意：必须静止2分钟，否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液，丌是通用洗柱液，丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用)，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
11.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
13. 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。


链霉亲和素磁珠 RNA纯化关键词：链霉亲和素磁珠,Magnetic beads binding with streptavidin,BTN130521


·DNA甲基化修饰试剂盒
编号：BTN130301
英文名称：Embedded Bisulfite Modification Kit
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。

产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)。

试剂盒组成：

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注: 包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。

储存条件：低温运输、4℃保存、避免反复冻融，有效期一年。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在 80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA将呈单链。
9．吸弃处理液A后，用1mL新鲜配制的处理液B(注：不是溶液B，配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA不超过700 ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750μL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底，得到1个包埋块。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作6次(步骤23)，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。


链霉亲和素磁珠 RNA纯化关键词：链霉亲和素磁珠,Magnetic beads binding with streptavidin,BTN130521


·核酸内切酶III(Nth)
编号：BTN130639
英文名称：Endonuclease III(Nth)
规格：1000U
核酸内切酶III(Nth)既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性，占E.coli AP酶总活性的90%。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶

(AP)位点。AP-裂解酶活性则切割AP位点的3´端，产生一个5´磷酸和一个3´磷酸-α,β不饱和醛。被核酸内切酶III识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6二羟基

胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

产品用途：
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数1:10⁴～1:10⁵；
➤ 碱性析出；
➤ 碱解旋。

产品组成：

成分	规格
核酸内切酶III(Nth)(10000 U/mL)	100μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：65℃20分钟。

活性定义：1单位指在10μl缓冲液体系中，37℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。

我公司正在打折促销RNA纯化全系列产品，恭候您的咨询选购链霉亲和素磁珠 RNA纯化。