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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
UDG酶北京厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多UDG酶等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:UDG酶北京厂家
规格:200U
品牌:百奥莱博
编号:JN0059
产地:国产|进口
UDG酶分子量25KDa,能特异性识别DNA单链或双链中的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止DNA发生突变,是碱基切除 修复过程中的重要组分,对RNA无活性。
产品用途:
UDG酶常被用于消除PCR扩增中的残余污染。在PCR反应液配制时,将dUTP和dTTP 按一定的比例混用,使得扩增产物都含有脱氧尿嘧啶。在进行PCR扩增前,在PCR混合液添加UDG酶,并增加2分钟37℃~50℃的保温步骤即可消除以往PCR产物的残留污染,由于UDG在PCR循环中的94℃dU的PCR产物。
使用建议:
UDG酶在Taq酶反应缓冲液中同样具有活性。在PCR反应液中直接添加UDG酶即可,推荐用量为0.2U每50μl体系,在PCR循环程序前增加2分钟37℃ ~50℃保温及可完全消除多达1ng含UTP模板的污染。
应用示例:
UDG酶特异性降解含UTP的DNA模板
反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 2×Taq MasterMix | 25μl |
| 500bp模板(含UTP) | 1ng |
| 500bp扩增引物对 | 终浓度0.2μM |
| 250bp模板(无UTP掺入) | 1ng |
| 250bp扩增引物对2 | 终浓度0.2μM |
| dH2O | 至50μl |
对照组未添加UDG酶,实验组每50μl反应体系中添加0.2U UDG酶。
PCR循环程序:
| 50℃ | 2分钟(降解含UTP的 污染模板) |
| 94℃ | 4分钟(灭活UDG酶) |
| 30次循环 | 94℃,30秒 57℃,30秒 72℃,30秒 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
图例1) 结果显示:UDG酶能特异性降解含UTP的DNA模板并阻止其 PCR扩增,且不影响正常模板的PCR 扩增反应。
泳道M:DL2000 泳道1,2:对照组,未添加UDG酶
泳道3,4:实验组,0.2U UDG酶处理
活性定义:60分钟内催化1nmol尿嘧啶从含尿嘧啶双链DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。
常用PCR残余污染消除体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 5×Taq Buffer with Mg2+ | 10μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM (终浓度) |
| dATP, dGTP, dCTP | 各0.2mM(终浓度) |
| dTTP | 0.1mM(终浓度) |
| dUTP | 0.2mM(终浓度) |
| 如全部使用dUTP替代dTTP | 0.4mM(终浓度) |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| Taq | 0.25μl(1.25U ) |
| ddH2O | 至50μl |
| UDG酶 | 0.2U,如残余污染严重可适量增加酶用量 |
我公司的UDG酶北京厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·重组人YY1
编号:JN1205
英文名称:Recombinant Human Yin and Yang 1 protein/Transcriptional repressor protein YY1
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成,目的基因编码的Val221-Gly321在C端含有His标签。
YY1质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
YY1制剂:冻干品
YY1保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
YY1复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于YY1:
Transcriptional repressor protein YY1(YY1)contains 4 C2H2-type zinc fingers and belongs to the YY transcription factor family. Multifunctional transcription factor exhibits positive and negative control on a large number of cellular and viral genes by binding to sites overlapping the transcription start site. The effect on transcription regulation of the protein is depending upon the context in which it binds and diverse mechanisms of action include direct activation or repression, indirect activation or repression via cofactor recruitment, or activation or repression by disruption of binding sites or conformational DNA changes. Its activity is regulated by transcription factors and cytoplasmic proteins that have been shown to abrogate or completely inhibit YY1-mediated activation or repression.
UDG酶北京厂家关键词:JN0059,百奥莱博,UDG酶
·重组人LIR-2
编号:JN1842
英文名称:Recombinant Human Leukocyte Immunoglobulin-Like Receptor Subfamily B Member 2
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成,目的基因编码的Gln22-His458在C端含有His标签。
LIR-2质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)
LIR-2制剂:冻干品
LIR-2保存:
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存,室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天,可分装后置于-20℃保存三个月。
LIR-2复溶:
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后,请根据用量分装冻存,避免反复冻融。
关于LIR-2:
Members of the immunoglobulin-like transcript (ILT) family are activating and inhibitory immunoreceptors whose genes are located same locus that encodes killer cell Ig-like receptors (KIR). Leukocyte Immunoglobulin-Like Receptor Subfamily B Member 2 (LIR-2) is a type I transmembrane protein. LIR-2 is expressed primarily on monocytes and dendritic cells (DC). Human LIR-2 is produced as a 598 amino acino acid precursor including a 21 aa signal sequence, a 440 aa extracellular domain (ECD), a 21 aa transmenbrane segment, and a 116 aa cytoplasmic domain. LIR-2 binds to Classical MHCI proteins. Ligation of LIR-2 incluces Tyr phosphorylation within its cytoplasmic ITIMs, a requirement for association with SHP-1. LIR-2 mediates tolerogenic DC-induced CD4+ T cell energy in vitro and in vivo.
UDG酶北京厂家关键词:JN0059,百奥莱博,UDG酶
·RealTime PCR MasterMix(SYBR Green)
编号:JN0049
英文名称:BalbStart SYBR qPCR UltraMix
规格:20μl×500次
本制品是采用SYBR Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中已经将DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTP、SYBR Green 等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本制品采用Hot Start Taq并结合特别配方的反应缓冲液,能有效抑制非特异性反应,提高了反应特异性,能够在更广的范围内进行准确定量。
产品特点:
高特异性:采用特殊工艺制造的HotStart Taq DNA聚合酶,可以进行热启动法PCR反应,大大提高了PCR扩增的特异性。
高效:百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用2×MasterMix,具有更高扩增效率和扩增灵敏度。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
使用建议:
1、保存:原则上-20℃遮光保存。如果持续使用,可在4℃内进行短期保存,但此时须遮光,建议使用遮光箱或用添附的铝袋进行保存。
2、使用:请上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经轻微离心后使用。 反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,尽 量避免污染。建议反应液体积为25~50 μl。
3、引物设计:一般为了增加敏感度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。另外对GC cluster(特 别是3´末端)等,会引起引物二聚体等非特异反应,一般不建议采用, 特别是Intercalater Assay受非特异性反应影响较大,更需注意。
4、First Strand cDNA的使用:由于逆转录酶经热处理后仍会对PCR有抑 制性影响,故建议将1st Strand cDNA合成反应液用蒸馏水稀释后再加以使用。
适用的Real Time PCR扩增仪:
ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500 Real-Time PCR System,7500 Fast
Real-Time PCR System(Applied Biosystems)
LightCycler(R℃he Diagnostics)
Line-Gene(Bioer,杭州博日)
Smart Cycler® System(Cepheid)
Mx3000P(Stratagene)
其他各种Real Time PCR扩增仪。
常用反应体系(20μl)
| 成分 | 体积 |
| 2×MasterMix* | 10ul |
| 上游引物 | 0.2-1.0uM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0uM(终浓度) |
| 模板 | 1-2ul |
| ddH2O | 至20ul |
| *Mg2+终浓度为2mM | |
常用PCR循环:
| 两步法PCR扩增程序(推荐): | |
| 94℃ | 10分钟 |
| 95℃ | 10秒 |
| 40次循环: | 95℃,5秒 60℃,20秒 |
| 三步法PCR扩增程序(引物TM值较低或其他原因): | |
| 94℃ | 10分钟 |
| 95℃ | 10秒 |
| 40次循环: | 95℃,5秒 57℃,20秒 72℃,20秒 |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购UDG酶北京厂家。
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