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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
156
- 英文名:
M5 HiPer pZERO-Blunt Simple零背景平末端快速连接试剂盒(专门针对TOPO载体ML022无效克隆的片段设计)
- 保质期:
1年
- 供应商:
江南纯
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
20T /4x20T
| 规格: | 20T | 产品价格: | ¥998.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 4x20T | 产品价格: | ¥3198.0 |
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文献和实验Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法,但载体和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
PCR Cloning Kit)(Topo XL PCR Cloning Kit) 因为越来越多高确限度热稳定酶如Pfx、Pfu被用于PCR 扩增,使到PCR 后都只是平端产物。这种平端克隆 往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。 Topo平端克隆 主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达
产生,造成筛选困难。 Topo平端克隆主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达,ccdB基因的表达蛋白,会破坏细菌的DNA gyrase,造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断,则ccdB基因表达受到阻碍,所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善,节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样,操作简单快速。 平端PCR克隆方法(Zero Blunt
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