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- 中国
- hFOB 1.19
- 2025年11月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
hFOB 1.19
- 库存：
5001
- 供应商：
蒂科生物
- 肿瘤类型：
无
- 细胞类型：
贴壁
- 品系：
人源细胞株
- 组织来源：
人
- 相关疾病：
人SV40转染成骨细胞
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
无
- 细胞形态：
成骨细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
无
- 器官来源：
人SV40转染
- 运输方式：
干冰
- 年限：
永久
- 生长状态：
正常
- 规格：
T25
一． 细胞特性
细胞名称：HFOB1.19 人SV40转染成骨细胞生长特性：贴壁成骨细胞样
种 属：人
STR鉴定：请咨询
培养难度：★★★
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二． 培养条件
培养基：90%DMEM/F-12+10%FBS（推荐HAKATA特级胎牛血清，货号:HB-FBS-500）温度：34℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳
三． 传代方式
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:3；
3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于34°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
四． 冻存条件
冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C。)
长期存储：液氮
五． 供应限制
该产品仅供研究使用。发货方式
我们采取两种形式的细胞发货方式：1. 复苏发货
a. T25瓶活细胞发货
b. 血清重悬发货
2. 冻存管发货(干冰发货)
对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管)，干冰覆盖保温运输。
复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。
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蒂科生物论文基金奖励方法
奖励对象：
使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列：血清、冻存液、试剂、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章，且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China，中文:HAKATA或蒂科生物)该奖励方案长期有效，欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦！
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文献和实验光素酶活力。在完成萤火虫荧光素酶活力（“实验”报告基因）的测定后，萤火虫发光被快速湮灭，并同时激活海洋腔肠荧光素酶的发光反应（“对照” 报告基因）。因此，DLR测试系统整合了两个测试化学，对共表达的两个报告基因作快速地定量，酶来自转染细胞裂解液，或无细胞转录翻译反应。萤火虫荧光素酶测试的线性范围延伸达酶浓度的8个数量级，可测定≤1fg （大约10 -20 摩尔）的实验报告基因酶（图3A）。用双荧光素酶报告基因测试系统，海洋腔肠荧光素酶的线性范围达酶浓度的7个数量级，较低的底限是≤10fg （大约3×10 -19
/ml，确保转染时细胞没有长满或处于静止期。因为转染效率对细胞密度很敏感，所以在不同实验间保持一个基本的传代步骤很重要。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量。细胞的融合度必须要达到90%才能做。 05启动子的选择 获得高转染活性所需选择的启动子依赖于选用的细胞系和要表达的蛋白。CMV启动子在大多数细胞类型中可以获得高表达活性。同其他启动子，如SV40和RSV(劳斯肉瘤病毒)相比，在BHK-21中其活性最高。这三种病毒启动子在T细胞来源的细胞系，如Jurkat中组成表达水平较低。转染
【求助】研究一个基因的5‘非翻译区是否含有低氧转录因子的结合位点,请指教
luoqq1985 这里做基因调控区的前辈一定不少，希望能给点意见，我在研究一个基因的5‘非翻译区是否含有低氧转录因子的结合位点，前期的工作是通过软件分析该区域是否存在这个结合位点的疑似序列，然后将这疑似的序列构人到PGL-3sv40中，转染细胞，经过低氧处理（低氧转录因子会增加）检测双萤光素酶的表达变化。如果有，还可以通过突变碱基进一步确定，但是如果不存在这样的结合位点，那我构出来的这个调控区质粒，不知道还可以做点别的什么试验？
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