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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
942
- 英文名:
Polybrene (hexadimethrine bromide)
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括聚凝胺现货供应在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:聚凝胺现货供应
产地:国产|进口
英文名:Polybrene (hexadimethrine bromide)
品牌:百奥莱博
规格:500ul
编号:SY0605
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染,慢病毒介导的基因转染,作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序,因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。
本产品为即用型溶液,粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液,并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1:2000稀释,依细胞种类不同稀释比例不同,具体查阅相关文献。
注:Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。
操作步骤(仅供参考,具体使用浓度请参考相关文献)
实验1:逆转录病毒感染(Retroviral Infection)
(1)重组逆转录病毒原液的制备:取5ml生长培养基(5%血清)加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后,吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
(2)待感染细胞的培养:100mm培养盘内加入10ml完全培养基,细胞密度为5×105/盘。
(3)病毒感染:细胞培养24h后,吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 (或将病毒原液稀释到2ml)感染细胞,polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
(4)收集病毒颗粒:加入8ml完全培养基。感染3天后,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
实验2:转染
(1)完全生长培养基培养细胞,培养细胞密度约50%;
(2)孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液,按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2ml,100mm培养皿3ml),37℃预热;②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀;③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
(3)去除培养基,在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液,在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
(4)去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1X HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3ml,100mm培养皿4ml)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s,使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
(5)立即去除DMSO shock solution,用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗,100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
(6)加入完全培养基到细胞中;
(7)稳定转化:去除生长培养基,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达:去除生长培养基,加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。
我公司的聚凝胺现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·Alexa Fluor 647标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:SY0674
英文名称:Alexa Fluor 647 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 647标记的山羊抗兔IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子,也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 647的光谱性质类似于APC,其最大激发波长(Amax)为651nm,最大发射波长(Emax)为667nm。本品适合做单标实验。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适用于大多数应用)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
·Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)
编号:SY0740
英文名称:Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗鸡IgY(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子,也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理,ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应,但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC,Amax(最大激发波长)为493nm,Emax(最大发射波长)为519nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75 mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
荧光素:Alexa Fluor 488, Amax=493nm; Emax=519nm
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
聚凝胺现货供应关键词:Polybrene (hexadimethrine bromide),SY0605,聚凝胺
·Alexa Fluor 594标记驴抗兔IgG(H+L)
编号:SY0727
英文名称:Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗兔IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子,也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、大鼠、绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理,ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red,Amax(最大激发波长)为591nm,Emax(最大发射波长)为614nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
荧光素:Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
聚凝胺现货供应关键词:Polybrene (hexadimethrine bromide),SY0605,聚凝胺
·人极低密度脂蛋白
编号:SY0448
英文名称:Human Very Low Density Lipoprotein(Human VLDL)
规格:2mg
人源极低密度脂蛋白(Human Very Low Density Lipoprotein(Human VLDL)),d≤1.006 g/mL,来自健康人源血浆,超速离心纯化获得,通过琼脂糖电泳检测其均匀性和纯度。本产品为无菌充氮包装,可以直接稀释使用。
极低密度脂蛋白(VLDL)为一种由肝脏制造的脂蛋白,在血液中转换成低密度脂蛋白,其主要功能是传送内源性三酸甘油脂、胆固醇、磷脂和胆固醇脂。为五种主要的脂蛋白按照分子量大小,主要分为以下几种(从高到低):乳糜(CM)、极低密度脂蛋白 (VLDL)、中间密度脂蛋白 (IDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、高密度脂蛋白(HDL),VLDL可以使脂肪和胆固醇在水溶性的血液中移动。VLDL粒子直径为30~80 nm。
纯度(Purity by Agarose Gel):>98%
浓度 :0.8-2.0 mg/ml
外观:乳状液体
缓冲液组分:1 µM EDTA in PBS, pH 7.4
储存条件:4℃,无菌避光,有效期6周
我公司正在火爆促销细胞生物学试剂系列产品,欢迎您的垂询选购聚凝胺现货供应。
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文献和实验病毒或对照病毒,使用生理盐水将两种病毒稀释为相同体积,且总体积不能超过150μl,注射后使用WD饲料或Paigen饲料饲养12周左右; Pcsk9D377Y过表达AAV现货供应 汉恒生物拥有人源、鼠源Pcsk9突变体过表达腺相关病毒(AAV9-CMV/APOE-Pcsk9D377Y),供动脉粥样硬化研究者造模使用,现货供应,质量有保证。详情垂询【400-092-0065】。 1、Schulz R, Schlüter KD, Laufs U.Molecular
,用0.22mm过滤,备用 转染SW620、HCT116细胞 一、1D接种两种细胞,1*10 5/孔 二、长到40%时加病毒2毫升,聚凝胺1.22ul 三、9小时换液。 mpyjr1977 感觉上病毒量好像有点大 zhujoker 个人认为你的病毒就不应该使用0.22um的滤膜过滤,细胞死的主要原因可能就是病毒的原因,但是我认为不是病毒滴度高的原因
作者:邓光权 作者单位:广东省粤北人民医院,韶关 512026 【摘要】为了比较贫血病人低红细胞浓度对盐水介质配血及改良聚凝胺配血的影响,将30例贫血病人每人抽取的静脉血4 ml,注入干试管2 ml,另外2 ml注入38%枸橼酸钠管作为交叉配血标本。干试管和枸橼酸钠管标本分别用离心机2500r/分钟离心10分钟,分离出血清尽量取足量的红细胞50 μl进行稀释,病人红细胞以盐水稀释成3%作为原液进行不同的稀释并与O型血的血清作盐水介质配血
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