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  • 服务名称: 慢病毒介导动物实验、细胞实验
    案例:凋亡抑制蛋白xx在肺癌中的表达及其功能的研究    实验分组为:未转染组,阴性对照组,阳性对照组(实验组)

    1、 靶向xx基因的RNA干扰对肺癌生物学功能影响的研究     
    1.1 构建针对XX基因的进行RNA干扰的病毒载体
    1.2 将该病毒载体转染入高表达xx基因的肺癌细胞株。
    1.3 检测干扰前后Caspase-3, Caspase-9酶的活性情况  
    1.4 生物学功能检测。
     (1) MTT检测细胞增殖情况
     (2) 流式细胞仪检测细胞周期
     (3) 流式细胞仪检测细胞凋亡
     (4) TUNEL检测细胞凋亡
     (5)电镜观察细胞凋亡
     (6) 平板克隆实验检测细胞增殖
     (7) 检测细胞侵袭转移情况

     2. 干扰后肺癌细胞生物学功能的检测:
     转染分组为:未转染组,阴性对照组,化疗药组,化疗药联合RNA干扰组

    (1)RNA干扰联合化疗药(自选)对肺癌生物学功能影响的研究;   
    (2)构建病毒载体同上。

     生物学功能检测
     (1) MTT检测细胞增殖情况

     (2) 流式细胞仪检测细胞周期
     (3) 流式细胞仪检测细胞凋亡
     (4) TUNEL检测细胞凋亡
     (5)电镜观察细胞凋亡
     (6) 平板克隆实验检测细胞增殖
     (7) 检测细胞侵袭转移情况
     
    3.动物实验
     RNA干扰动物实验
    (1)将肺癌细胞注射到裸鼠(4-6周龄)皮下,同时将培养稳定生长的干扰的细胞株也注射入裸鼠上,或者当肿瘤长大后将干扰病毒直接注入裸鼠肿瘤中,裸鼠分组为:正常细胞组,阴性对照组(注射生理盐水或其他阴性对照),RNA干扰组。处理后观察后裸鼠肿瘤的生长情况。
    (2)处理后观察半个月到一个月,然后将裸鼠处死,取下肿瘤标本,免疫组化,实时定量PCR,Western blot方法中 的检测目的基因的表达变化。
    (3)对取下的肿瘤标本采用TUNEL检测细胞凋亡,电镜观察细胞凋亡。

    4.蛋白组学和质谱分析
    将RNA干扰前后的目的细胞进行蛋白组学研究,寻找差异蛋白。找到的差异蛋白进行质谱分析后用WB来鉴定。


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    分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!
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    【电话】 023-65316016,023-65316556
    【邮箱】 china-western@163.com
    【官网网址】www.cqwestern.com
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