天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

产品名称：天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Variola Virus(VARV)
产品仅供科研使用分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1.   阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2.   阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3.   以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1.   阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3.   阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1.   实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2.   试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。

天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酰辅酶A三锂盐Acetyl coenzyme A trilithium salt质量规格：95%,美国进口原装
人胰腺上皮细胞完全培养基 100mL尿素酶,脲酶(巨豆)Urease质量规格：>45 U/mg,进分
HT1080细胞，人成纤维肉瘤细胞 热带念珠菌 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-1A3蛋白酶VIIIProtease type VIII质量规格：美国原装进口7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌
CCL3 Protein Rat 重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白曲安奈德Triamcinolone Acetonide质量规格：>98%,BR
MDBK(牛肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲安奈德(标准品)Triamcinolone Acetonide质量规格：>98%,标准品
PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 草酸依地普仑/草酸艾司西酞普兰（标准品）Escitalopram Oxalate质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril质量规格：>99.5%，EP6.2
BEL-7402细胞，肝癌细胞 人口腔表皮样癌细胞,KB细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲（标准品）Racecadotril质量规格：HPLC>98%,标准品
C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin质量规格：>1200u/mg,CP2005
CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼罗替尼Nilotinib质量规格：>98.5%,BR
小鼠神经干细胞柴胡皂苷B2（标准品）Saikosaponin B2质量规格：HPLC≥98%，标准品
人胚胎，皮肤，肌肉;M-22 人食管上皮细胞完全培养基 100mL柴胡皂苷C（标准品）Saikosaponin C质量规格：HPLC≥98%，标准品
人间充质干细胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA柴胡皂苷D(标准品)Saikosaponian D质量规格：HPLC≥98%，标准品
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人细胞裂解液 (阳性对照) 常春藤皂苷元(标准品)Hederagenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
大鼠肝细胞;BRL 3A常春藤皂苷元Hederagenin质量规格：HPLC≥97%,BR
天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)荧光素酶(细菌)，英文名或英文缩写：Luciferase from Bacteria，级别：精制级，40u/mg，规格：5克
T/G细胞，人血管平滑肌细胞 KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株,LⅡ细胞 人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L三钠盐三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用试剂
NEC(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2拂橡胶 III Fluoro gum III
Caki-1(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞;J774A.1ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级1000 UnitsCOLD
绵羊皮肤细胞;OAR-S1硅烷偶联剂SILANE COUPLING AGENT
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。