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45
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
绵羊鞭虫探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。产品仅供科研使用
产品名称：绵羊鞭虫探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Trichuris ovis
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
SMMC-7721人肝癌细胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin质量规格：>99%,AR,BP2010
RSPO1 Protein Mouse 重组小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)吲哚美辛（标准品）Indometacin质量规格：HPLC>98%,标准品
人支气管平滑肌细胞 (HBSMC)( 5×105 ) MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse西米替汀Cimetidine质量规格：>99%,USP32,A型
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163西米替汀（标准品）Cimetidine质量规格：HPLC>98%,标准品
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿德福韦/阿德福韦酯Adefovir dipivoxil质量规格：>99%,可用于细胞培养
CM-H091人大隐静脉内皮细胞完全培养基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate质量规格：>95%,BC
GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder质量规格：>99%,BC
人癌细胞;MDA-MB-435S 人视网膜微血管内皮细胞完全培养基 100mL碱式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic质量规格：>99%,BR
人结肠平滑肌细胞总RNAHCSMC NA雷氏曼着色剂Leishman's stain质量规格：BS
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 来普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton质量规格：>95%(HPLC),BC
雪羊皮肤细胞;SSHS1知母皂苷元质量规格：HPLC≥98%，标准品Sarsasapogenin
VCL Others Human 人 VCL / Vinculin 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-去甲鬼臼质量规格：标准品,用于含量测定4'-Demethylpodophyllotoxin
木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL杠柳毒苷质量规格：HPLC≥98%，标准品Periplocin
BEL-7402人肝癌细胞 BEL-7402 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS1,2-二亚油酰甘油质量规格：美国进口原装1,2-Dilinoleoylglycerol
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白 (His 标签)毛地黄毒苷配基质量规格：>97.0%(LC),原装进口Digitoxigenin
绵羊鞭虫探针法荧光定量PCR试剂盒大鼠脑胶质瘤细胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超级透明无色液体RTsigma
杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 小鼠脉络膜血管细胞完全培养基 100mL二异脲酸钠 Sodium dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G 通用试剂
HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 Humanα-1,6 葡聚糖 GLYCOGqN 9002-79-
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 粘液素II，英文名或英文缩写：Mucin，级别：BR，200u/mg，规格：1公斤
人红系白血病细胞;TF-1姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。产品仅供科研使用
产品名称：绵羊鞭虫探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Trichuris ovis
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
SMMC-7721人肝癌细胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin质量规格：>99%,AR,BP2010
RSPO1 Protein Mouse 重组小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)吲哚美辛（标准品）Indometacin质量规格：HPLC>98%,标准品
人支气管平滑肌细胞 (HBSMC)( 5×105 ) MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse西米替汀Cimetidine质量规格：>99%,USP32,A型
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163西米替汀（标准品）Cimetidine质量规格：HPLC>98%,标准品
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿德福韦/阿德福韦酯Adefovir dipivoxil质量规格：>99%,可用于细胞培养
CM-H091人大隐静脉内皮细胞完全培养基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate质量规格：>95%,BC
GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder质量规格：>99%,BC
人癌细胞;MDA-MB-435S 人视网膜微血管内皮细胞完全培养基 100mL碱式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic质量规格：>99%,BR
人结肠平滑肌细胞总RNAHCSMC NA雷氏曼着色剂Leishman's stain质量规格：BS
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 来普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton质量规格：>95%(HPLC),BC
雪羊皮肤细胞;SSHS1知母皂苷元质量规格：HPLC≥98%，标准品Sarsasapogenin
VCL Others Human 人 VCL / Vinculin 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-去甲鬼臼质量规格：标准品,用于含量测定4'-Demethylpodophyllotoxin
木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL杠柳毒苷质量规格：HPLC≥98%，标准品Periplocin
BEL-7402人肝癌细胞 BEL-7402 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS1,2-二亚油酰甘油质量规格：美国进口原装1,2-Dilinoleoylglycerol
IL34 Protein Mouse 重组小鼠 IL-34 蛋白 (His 标签)毛地黄毒苷配基质量规格：>97.0%(LC),原装进口Digitoxigenin
绵羊鞭虫探针法荧光定量PCR试剂盒大鼠脑胶质瘤细胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超级透明无色液体RTsigma
杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 小鼠脉络膜血管细胞完全培养基 100mL二异脲酸钠 Sodium dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G 通用试剂
HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 Humanα-1,6 葡聚糖 GLYCOGqN 9002-79-
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 粘液素II，英文名或英文缩写：Mucin，级别：BR，200u/mg，规格：1公斤
人红系白血病细胞;TF-1姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
一种用于肝素粗品质量监测的、检测原料药中反刍动物DNA的多重RT-PCR分析方法的开发
动物源污染的实时荧光定量PCR技术。该检测法由一套针对反刍动物（牛、绵羊、山羊）和猪的冻干引物、探针及扩增内标组成。该方法经过两处分析机构验证：第一个位于FDA，第二个位于某州独立实验室。肝素钠多重实时荧光定量PCR（hMRTA）检测方法性能通过了美国FDA兽药中心研发处制定的特异性、灵敏度和专一性严格验收标准。符合早前建立的饲料中反刍动物原料多重实时荧光定量PCR检测法的灵敏度和重复性要求。hMRTA法检测猪源肝素钠粗品，98%达灵敏度，真阳性98%、假阴性2%。PCR检测法检测三个反刍动物物种，可作
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