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- 上海研生
- HE81691-R
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
58
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测 猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据 猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用成分，但不能检测其他非 猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
| 产品名称 | 猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 |
| 英文名称 | 详见说明书 |
| 编号 | HE81691-R |
荧光化学物质：
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
荧光定量PCR服务：
简介：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
100g5g哌嗪-N,N-双（2-磺酸）Mannma binding protein;mannan binding lectin 2高纯，98%100gCH
25g1g哌嗪-N,N-双（2-磺酸）Nogo-Breceptor高纯，98%25gBV-Ab
5g50MG哌嗪-N，N-双（2-磺酸钠）RTN4高纯，98%5gp-Tau
500g1g哌嗪-N，N-双（2-磺酸钠）RTN4BAR，99.8%500gBCG-Ab
25g5g哌嗪-N，N-双（2-磺酸钠）Major Facilitator Superf탧堡槍᱄ᦜ㥄岉鳜ༀ赖餂ꋭ䖐Ⴛ㶤㋰ฃ컱凉齢鿦緀犷즜㨶齫ꡎ擿損ׄ㊯
猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用分析标准品, ≥99.5% (GC)500g1g精酸琼脂糖凝胶4BCoactosin Like Protein 1AR，99%分析标准品, ≥99.5% (GC)500gHL
分析标准品,≥99%100g5g赖酸琼脂糖凝胶4BTransgelin 2CP分析标准品,≥99%100gPrx1
分析标准品500g100ml基琼脂糖凝胶4BMannose Associated Serine Protease 1CP分析标准品500gCYGB
分析标准品,99%100g25ml羧基琼脂糖凝胶4BRas-GAPBR，98%分析标准品,99%100gCK-BB
分析标准品,用于食品分析25g10mlNHS活化琼脂糖凝胶4FFRabies virus IgGBR，98%分析标准品,用于食品分析25gPSCK9
分析标准品100g50ml环氧琼脂糖凝胶6BUbiquitin-specific protease 2BR，98%分析标准品100gapoA1P
分析标准品,用于环境分析25g1gCon A琼脂糖凝胶4Bribonuclease, RNase A family, 2BR，98%分析标准品,用于环境分析25gHDAC
分析标准品500g25g脒琼脂糖凝胶4FFHyaluronidase 2BR，98%分析标准品500gDNMT
分析标准品10ml5gGST琼脂糖凝胶4FFZEB2BR分析标准品10mlLTA
分析标准品10ml×10支25g琼脂糖凝胶4FFRECKBR分析标准品10ml×10支CART
原理:
猪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
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文献和实验一种用于肝素粗品质量监测的、检测原料药中反刍动物DNA的多重RT-PCR分析方法的开发
动物源污染的实时荧光定量PCR技术。该检测法由一套针对反刍动物（牛、绵羊、山羊）和猪的冻干引物、探针及扩增内标组成。该方法经过两处分析机构验证：第一个位于FDA，第二个位于某州独立实验室。肝素钠多重实时荧光定量PCR（hMRTA）检测方法性能通过了美国FDA兽药中心研发处制定的特异性、灵敏度和专一性严格验收标准。符合早前建立的饲料中反刍动物原料多重实时荧光定量PCR检测法的灵敏度和重复性要求。hMRTA法检测猪源肝素钠粗品，98%达灵敏度，真阳性98%、假阴性2%。PCR检测法检测三个反刍动物物种，可作
基团（Quencher）,其存在时可抑制信号基因的功能，不产生发光现象。 荧光PCR反应的实现 定量依据： 在PCR扩增特定基因时，反应体系中原始模板数愈多，到达平台期所需的循环数愈少；原始模板数愈少，到达平台期所需的循环次数愈多。 将不同浓度的原始模板数对PCR扩增到检测阈值所需的循环次数（Ct值）作图，便得到一个标准曲线 7700型定量PCR仪 Taq Man试剂盒（PE USA） 荧光定量PCR的过程 样品常规处理 → 加入反应管,设置阴,阳性对照 → PCR仪扩增 →电脑分析后给出
组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。5. 溶解曲线不止一个主峰 引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。 引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的 mix 试剂盒。 模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。6. 扩增效率低 反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。 反应条件不够优化：可适当降低退火温度或改为三步扩增法。 反应体系中有PCR反应抑制
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