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丝状支原体簇探针法荧光定量PCR试剂盒

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  • 2025年07月12日
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    • 供应商

      上海邦景

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      50T

    服务流程:
    1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
    2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
    3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
    4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
    5、返还样品(引物、RNA和cDNA)

    产品细节图片1
    产品名称:丝状支原体簇探针法荧光定量PCR试剂盒
    规格:Mycoplasma mycoides cluster

    编号:BJR2675
    分类:探针法荧光定量PCR
    储存条件:-20
    避光保存,避免反复冻融。
    运输:低温、避光,快递免费送货上门。

    产品细节图片2
    规格及成分:
    成 分 编 号 十孔盒包装
    MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
    MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
    微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
    TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
    2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
    PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
    5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
    5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
    RNase-Free 水 80403 1 mL
    使用手册 101105sc 1 份

    组成及试剂配制:
    1、酶标板:一块(96孔)
    2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
    3、 样品稀释液:1×20ml。
    4、 检测稀释液A:1×10ml。
    5、 检测稀释液B:1×10ml。

    储存条件:
    产品仅用于科研14或-20样品收集、处理及保存方法
    1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
    3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
    4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
    5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20
    ,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    产品细节图片3
    特点优势:
        1.   产品仅用于科研特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
        2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
        3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
        4.   实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
        5.   优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
        6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

    PCR反应五要素: 
    丝状支原体簇探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
    设计引物应遵循以下原则:

    引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
    引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
    引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
    引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
    引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
    ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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    产品及特点:
    本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
    1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
    3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4
    保存一月以上。
    4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
    5. 适用于大多数植物叶片和种子。
    使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95
    保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4保存。


     

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