- ￥1248
- 邦景
- BJ-PJ6668
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1000U
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| rTEV蛋白酶 | BJ-PJ6668 | 1000U | 1248 |
描述：
rTEV 蛋白酶（重组型）是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，该酶特异性识别 Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列，并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。该酶经 6×His 标签纯化而得(含组氨酸标签)，纯度达99％，剪切反应完毕后可通过 Ni-NTA Resin )去除。该酶在 4℃-30℃温度、pH 范围（6.0-8.5）反应条件下均具有活性。
活性定义：在 1×rTEV Buffer（50 mM，pH8.0, 0.5 mM EDTA,1mM DTT），30℃反应 1h，剪切>85％的 3 μg 底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用：融合蛋白标签剪切去除。
储存：长期储存-70℃，可储存 2 年，-20℃可储存 6 个月。
操作方法
1. 在 EP 管中配制如下反应体系
融合蛋白 20 μg
20×rTEV Buffer 7.5 μl
0.1M DTT 1.5 μl
rTEV Protease 1-3 μl
ddH20 Up to 150 μl
2. 30℃孵育，在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液，置于单独的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 30 μl 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4. 样品全部反应完毕后，样品煮沸 5 min，取 40 μl 进行SDS-PAGE 分析。
5. 如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于 4℃，请延长反应时间，并增加 rTEV 酶用量。
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文献和实验［原理］ 在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶，一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来，然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性（pH3.0左右），使大量的酸性
问：小弟要做蛋白酶体抑制剂筛选相关的工作，在dxy上看了前辈的不少文章，先谢谢大家了。不过我还是有些不了解： 1、大家做蛋白酶体相关实验时，蛋白酶体需要纯化吗？一般怎么纯化？ 2、做蛋白酶体抑制剂的筛选相关步骤。 3、大家有没有谁做过蛋白酶体的表达的，亚基也行。 答：你去找一套叫 Methods in Enzymology的书，在 Volume 398 的PartB应该有你需要的东西。 Table of Contents-B.pdf
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
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