50%PEG1450即用型溶液

细胞融合实验流程

virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重排。 二、方法 (1)取新鲜鸡血以0.85%生理盐水制成10%的悬液。 (2)称取0.5克PEG(MW=4,000)放入试管内，在酒精灯上融化之，迅速加入0.5ml预热的Hanks液混匀制成50%的PEG溶液。放入37℃水浴中待用。

如何做好 Southern 杂交？

大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方：PEG 6000 10%；SDS 0.5%；6×SSC；50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1．预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min，在杂交瓶中加入杂交

毕氏酵母氯化锂转化法

； 注：不要将感受态酵母菌冰浴； 毕氏酵母的转化 1. 煮沸1ml鲑鱼精DNA 5min，迅速冰浴以制备单链担体DNA；鲑鱼精DNA主要是防止目的基因的降解，协助目的基因的转化 2. 将感受态酵母菌离心，以Tips去除残余的LiCl溶液； 3. 对于每一个转化，按以下顺序加入： 50% PEG3350                      240ul 1M LiCl                           36ul 2mg