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- 一基
- 上海
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- 2025年07月11日
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文献和实验以无氧气体充填，以保持厌氧状态。 3．某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长，此时请将步骤二(2)重复一次。 液氮超低温保藏程序 1、容器的选择：使用带螺旋盖的2ml塑料安培瓶。 2、检查安培瓶是否渗漏：用0.05%的亚甲基蓝水溶液在4℃浸泡30-45分钟，冲洗干净，弃去含有蓝色染料的安培瓶，其余的安培瓶备用。 3、打印标签（激光打印）。 4、容器的灭菌：先用蒸馏
，利用重力使胶片掉落到染色缸中。若要进行蛋白质转印，则胶片不能染色，要浸入转印缓冲液中。 13） 在CBR 中染色约30 min,染色盘要加密盖，置于旋转平台慢速50 rpm 摇荡的；要注意胶片是否完全没入染色液中，否则会造成染色不均匀。 14） 染色后小心把CBR 染剂倒回原来瓶中，整块胶片变成蓝色，先用自来水洗掉残余的染色液，再倒入约20 mL 脱色液，加密盖后再放回旋转平台摇荡。染色脱色过程请戴手套，否则会在胶片上留下指纹。 15） 胶片的蓝色背景渐渐脱掉，待脱色液转成蓝色后，可以换新
倍数，再乘以104，即为每ml 中之细胞数目。 1.3. 存活测试之步骤为dye exclusion，利用染料会渗入死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue 染料，如果细胞不易吸收trypan blue，则用红色之Erythrosin bluish。 2. 材料： 2.1. 0.4 % w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 2.2. Erythosin
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