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文献和实验采用回收的聚丙烯(这种情况下,我们只能说它的主要成分是聚丙烯),这类吸头一般柔软性很差,吸头壁较厚。而柔软性差的吸头容易导致吸头与移液器的密封一致性差;吸头壁厚则容易使液体残留,且排液不灵活。 二、 吸头的制造和生产工艺 除了吸头原材料之外,大多数吸头在制造的过程中还会加入显色材料和少量的添加剂,比较常见的有: 1. 显色材料。市场上俗称的蓝色吸头(1000μL)和黄色吸头(200μL),就是在聚丙烯中加入了相应的显色材料。显色材料需要用高品质的色母粒,而非低廉的工业
即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
药物的介质,而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加,会试验敏感性。因此,一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞:1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可
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