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文献和实验科研君们,当埋头实验几月找到了目标基因片段,电泳时条带却突然消失了;千辛万苦分离纯化的物质,色谱图中却意外出现杂质峰,苦苦查询,可能仍找不到问题原因。若问题只在小小的吸头上,科研君的心还能淡定吗? 吸头的问题在哪里,如何保证纯净无污染的吸头?需要考虑以下几方面因素: 一、 吸头材质 吸头市场上,原材料基本都是聚丙烯塑料(低吸附,化学惰性高,使用温度范围广,无色透明)。也许大家不知道的是,同样是聚丙烯,品质会有大的差别。高品质的吸头一般采用天然 100% 纯聚丙烯,而低廉的吸头则很多
10min。4)用1×TBST buffer 浸洗玻片3min,重复1次。6.荧光染色放大信号:1)去除玻片上残存洗液。2)用移液器在玻片上滴加1X染料工作液100ul(使用信号放大液按1:100稀 释),浸没样本区域。3)室温 保湿震荡孵育10 min。4) 1X TBST buffer浸洗玻片,室温浸片3 min,重复3次5) 微波修复,室温自然冷却至室温。6)灭菌水洗片1次,1X TBST buffer浸片2min。7)单染结束,封片观察或追加后续染色。7.封片:1)去除玻片上残存洗液,滴加
即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
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