- ¥1298
- 泽叶生物
- ZY3012D
- 国产/进口
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
One Step Seamless Cloning kit
- 保质期：
切勿冻存，有效期24个月
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
长时间储存于4℃
- 规格：
20次
产品介绍：
Seamless Cloning(无缝克隆)技术提供了一种新的、高效快速的基因克隆方法， 一步法无缝克隆试剂盒不依赖于T4连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，而直接用重叠片段重组的方法，采用特殊的酶组合可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有16-25bp重叠区域的PCR片段定向重组连接，可以30分钟内实现平末端PCR产物片段高效定向无缝克隆至载体的任意位点。。
产品储存：
储存：－20℃ 保存，避免多次反复冻融。
产品特点：
1. 30分钟可以将一个50bp-15kb PCR扩增片段（平末端/A端）克隆定向插入任意载体的任意位置。
2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位点进行克隆。
3.无缝克隆，插入点不会引入不需要的碱基序列。
4.不依赖于连接酶及磷酸酶，高效，准确，克隆阳性率可达95%以上。
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文献和实验的产物是闭合载体，可以直接进入 Step 4 了。 · Step 4 · 转化感受态细胞或者 RCA 了。还有的产品甚至连后面的聚合酶和连接酶都不需要，克隆效率一样高还能避免填补缺口时的意外错配，强的。 因为整个过程不会引入额外的碱基，可在预定位置精准插入外源片段，因此亦有无缝克隆，无痕克隆的美誉。这个方法还可以实现一步完成多个片段连续组装，只要设计 PCR 引物让相邻片段之间具有 15-30 个碱基的同源序列重叠，就可以实现单管一步反应，完成组装，而且还成功率高，保真度高，能大大减少重复
-PCR Kit（高效一步RT-PCR试剂盒） 15、DNA Blunting Kit（DNA平端化-连接试剂盒） 16、Nova T4 DNA Ligase 17、Nova Rapid Ligating Kit（Nova快速DNA连接试剂盒） 18、One-Step Competent Cell Prep Kit（一步法感受态细胞快速制备试剂盒） 19、Random Primer Labeling Kit（随即引物标记试剂盒） 20、T7 RNA Polymerase 21
了，有些基因的平台期是达不到很高的（这不是因为荧光标记得影响），要看你摸的时候不同循环的扩增产物的量之间的关系，在相邻之间的差异基本复合线性增长才是线性期。 一步法还是二步法：我一直不建议采用一步法，因为逆转录酶很贵，就做一次PCR ，多可惜啊！还有RNA。而且反转录了之后可以做10－20次，还可以摸条件找原因。不要以为一步法是盒子，实际上是一样的，操作没有什么不同，还没办法摸条件，早该淘汰了（特指RT-PCR 过程中）。对于少量的标本用1ug的反转录酶既可以了，或者用于预实验都是很好
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