ISOTISSUE（从动物组织提取DNA试剂盒）

ISOTISSUE

从动物组织提取DNA试剂盒

 

　　ISOTISSUE用于从动物组织提取基因组DNA。无需使用苯酚、氯仿等有害物质。使用微量离心管，操作简便。整个实验只需3小时即可完成。可提取数十～数百kbp的高纯度基因组DNA ，可用于限制性内切酶底物及PCR。

 

 

◆特点

 

　　•　提取数十～数百kbp的基因组DNA

　　•　无需苯酚、氯仿

　　•　使用微量离心管（1.5 ml微型管），操作简便

 

 

◆产品内容

 

ISOTISSUE （3次用量, 30次用量）

产品	容量（3次用量）	容量（30次用量）	备注
Extraction   Buffer	1 ml x 2	20 ml x 1	若有SDS析出，请在37°C条件下进行孵化，待析出物溶解后即可使用。
20 mg/ml   Proteinase K	150 µl x 1	1.5 ml x 1
5M NaCl	0.7 ml x 1	7 ml x 1
TE (pH 8.0)	1 ml x 2	20 ml x 1
10 mg/ml  　　RNase   A	20 µl x 1	0.2 ml x 1	可能会有白色沉淀析出，但不影响品质及性能。若有沉淀析出，请进行离心，取上清液使用。
3M Sodium   Acetate (pH 5.2)	0.2 ml x 1	1 ml x 2
3M LiCl	0.7 ml x 1	7 ml x 1	使用前，请调制Wash Solution（0.3M LiCl、15mM Sodium Citrate、75% Ethanol）
150 mM Sodium   Citrate	0.7 ml x 1	7 ml x 1	使用前，请调制Wash Solution（0.3M LiCl、15mM Sodium Citrate、75% Ethanol）

 

备注

　　不含异丙醇、乙醇及灭菌水。

 

◆使用实例

 

操作流程

　　*注释部分请参考产品手册。

 

Data 1: 从小鼠各组织提取基因组DNA

 

　　对从小鼠各组织提取的基因组DNA进行脉冲场凝胶电泳，结果及回收量标准如下。

 

 

小鼠组织	DNA（µg/mg tissue）
肝脏	0.5 ～ 1
肾脏	0.2 ～ 1
心脏	0.5 ～ 1.5

 

Data 2: 对从小鼠各组织提取的基因组DNA进行限制性内切酶处理

 

　　使用EcoRⅠ，对从小鼠各组织提取的基因组DNA进行限制性内切酶消化处理。

 

 

 

Data 3:以从小鼠各组织提取的基因组DNA为模板进行PCR，扩增DNA

 

　　以小鼠各组织提取的基因组DNA为模板进行PCR，扩增含有β-actin 基因的DNA 断片。

织提取的基因组DNA为模板进行PCR，扩增DNA

 

标记物4 （φ X174 DNA/ Hae Ⅲ） 心脏 胃 肾脏                                      Agarose X 3%gel                             TAE Buffer 50V 80min.    使用Taq DNA Polymerase (Gene Taq )