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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Exosome Isolation Kit(from cell culture media)
- 保质期:
切勿冻存,有效期24个月
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
长时间储存于4℃
- 规格:
10rxns
产品介绍:
外泌体(Exosome)是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构,密度1.13-1.21g/ml,内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质,天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳等。越来越多的证据表明,对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。
获得高纯度的大量外泌体样本是开展外泌体研究的基础,也是保障研究结果准确性的前提。经典的超速离心法(差速离心)、密度梯度离心法、免疫磁珠法、超滤法在外泌体制备过程中经常受到大型仪器设备的资源限制,并且存在操作复杂、耗时、外泌体量少、纯度低、价格高等缺陷。因此,试剂盒法逐渐成为外泌体提取方法中的主流技术,可帮助绝大多数科研人员获得高质量外泌体。
本公司提供的Exosome Isolation Kit(from cell culture media)细胞上清外泌体提取试剂盒 (以10ml细胞上清样本为一次反应)不仅有效提高外泌体得率,同时能够显著减少杂蛋白残留(如血清高丰度蛋白)。该试剂盒可以实现细胞上清液样本中外泌体的快速提取,为后期外泌体研究的数据稳定性和可靠性提供保障。
特点
外泌体纯度高
外泌体得率高
操作简便,周期短
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文献和实验细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心,3000g,15min; 3.离心后样本(有略微沉淀) 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层; 震荡混匀; 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上,离心 10000g,60min; 6.离心后的样本(沉淀明显,沉淀中富含外泌体) 将上清吸出留下沉淀,将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液; 7.加 PBS 重悬沉淀; 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
左右;针对干细胞、神经细胞等可以将浓缩倍数提升到 10 倍左右,因为这些细胞外泌体分泌量相对肿瘤细胞来说要少很多。 第四步外泌体提取: 方法 优点 缺点 超速离心法 提取量相对较大 一法适用多类样品 成本较低 操作复杂度高 耗时长 因离心管材质量高低,管壁吸附损失程度不同 同时检测的样品数量有限 需要超速离心机 外泌体提取试剂盒 操作简单 耗时较短 不需超速离心机 纯度较超速离心法高 单次处理体积偏小 文章来源:宇玫博生物
基中的营养物质(包括外泌体)全部消耗掉的,这时的上清液中的外泌体含量大幅度下降。 接着,从细胞上清液的预处理下手。拿到细胞上清液收集后该如何处理呢?这是一个常见问题。我们先要弄清楚细胞上清液中会有什么物质?除了我们感兴趣的外泌体外,还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。我们首要做的就是通过差速离心尽可能的去除一些杂质物,先用 800 ~ 1000g 左右的离心力 10 分钟有效去除细胞残留,取上清后,再 8000 ~ 10000g 离心 10 分钟有效去除细胞
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