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- 百奥莱博
- QN1082-HQZ
- 北京
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
158
- 英文名：
RIPA buffer(high)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
20ml|100ml
特别提示：包括高效RIPA裂解液(组织/细胞)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：高效RIPA裂解液(组织/细胞)
英文名称：RIPA buffer(high)
产品货号：QN1082
产品规格：20ml|100ml
高效组织细胞裂解液主要用于从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。组织活细胞本产品配有一支PMSF(0.3ml/1.5ml)
使用说明
如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量，取每1ml RIPA加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用 (PMSF现用现加)。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150～250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50～100万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
储存条件：4℃
我公司销售的高效RIPA裂解液(组织/细胞)北京品牌，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 （ aprotinin ），1μg/ml亮抑蛋白酶肽 （ leupeptin ）裂解液缓冲液：10mM Tris-HCl（pH7.4），0.15M NaCl，5mM EDTA（pH8.0），1%Triton×100；使用前加5mM DTT，0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液：①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min（每500000个细胞20μl RIPA缓冲
血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南（DP304）——动物组织
以下操作按照天根产品 DP304 血液/组织/细胞基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 大鼠肝脏10-30 mg 研磨器2. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管3. PBS溶液，无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。本文
，比如 RIPA，虽然裂解剧烈，但是无法维持蛋白天然构象，会破坏互作蛋白对。 如果自配，建议采用温和系统，比如 NP40/Triton 0.1%-1%；SDS ≤0.1%，盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合，要考虑孵育（结合）顺序 如果抗体和 beads 先孵育，建议 选择 pH 8.2（更常用）或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y，抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
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