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- 百奥莱博
- BTN15-104-TDW
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- 2025年06月23日
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北京百奥莱博科技有限公司
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50次
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产品名称：鹅源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
产品货号：BTN15-104
产品规格：50次
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文献和实验一种用于肝素粗品质量监测的、检测原料药中反刍动物DNA的多重RT-PCR分析方法的开发
动物源污染的实时荧光定量PCR技术。该检测法由一套针对反刍动物（牛、绵羊、山羊）和猪的冻干引物、探针及扩增内标组成。该方法经过两处分析机构验证：第一个位于FDA，第二个位于某州独立实验室。肝素钠多重实时荧光定量PCR（hMRTA）检测方法性能通过了美国FDA兽药中心研发处制定的特异性、灵敏度和专一性严格验收标准。符合早前建立的饲料中反刍动物原料多重实时荧光定量PCR检测法的灵敏度和重复性要求。hMRTA法检测猪源肝素钠粗品，98%达灵敏度，真阳性98%、假阴性2%。PCR检测法检测三个反刍动物物种，可作
基团（Quencher）,其存在时可抑制信号基因的功能，不产生发光现象。 荧光PCR反应的实现 定量依据： 在PCR扩增特定基因时，反应体系中原始模板数愈多，到达平台期所需的循环数愈少；原始模板数愈少，到达平台期所需的循环次数愈多。 将不同浓度的原始模板数对PCR扩增到检测阈值所需的循环次数（Ct值）作图，便得到一个标准曲线 7700型定量PCR仪 Taq Man试剂盒（PE USA） 荧光定量PCR的过程 样品常规处理 → 加入反应管,设置阴,阳性对照 → PCR仪扩增 →电脑分析后给出
组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。5. 溶解曲线不止一个主峰 引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。 引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的 mix 试剂盒。 模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。6. 扩增效率低 反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。 反应条件不够优化：可适当降低退火温度或改为三步扩增法。 反应体系中有PCR反应抑制
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