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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 英文名：
Human Polyomavirus 7（HPyV7）
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
| 产品名称 | 人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Human Polyomavirus 7（HPyV7） |
| 编号 | EY00P4147 |
人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
产品及特点:
人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
以下是公司正在促销打折产品：
兔白细胞介素IL-定量检测试剂盒 Germanium standard 质量规格：1000μg/mlCAS: 7440-56-4
兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体定量检测试剂盒 Germacrone 质量规格：HPLC≥99%，标准品CAS: 6902-91-6
兔血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaGP-ⅡbⅢaCD4+CD6定量检测试剂盒 Geraniol 质量规格：含量测定CAS: 106-24-1
兔细胞间粘附分子-ICAM-定量检测试剂盒 Geraniin 质量规格：HPLC≥98%，标准品CAS: 60976-49-0
兔碱性磷酸酶ALP定量检测试剂盒 Gentiopicroside 质量规格：HPLC≥98%，标准品CAS: 20831-76-9
兔白细胞介素35IL-35定量检测试剂盒 Gentiobiose 质量规格：>96%，原装进口CAS: 554-91-6
兔白细胞介素βIL-β定量检测试剂盒 Gentamicin 质量规格：效价测定CAS: 1403-66-3
兔水通道蛋白4AQP4定量检测试剂盒 Gentamicin sulfate 质量规格：含量测定CAS: 1405-41-0
兔氧化低密度脂蛋白OxLDL定量检测试剂盒 Gentamicin sulfate 质量规格：>590IU/MG,BRCAS: 1405-41-0
兔前列腺素F2aPGF2a定量检测试剂盒 Gentamicin C1a 质量规格：美国进口CAS: 26098-04-4
兔基质金属蛋白酶-3MMP-3定量检测试剂盒 Genistin 质量规格：HPLC≥98%，标准品CAS: 529-59-9
兔C-反应蛋白CRP定量检测试剂盒 Genistein 质量规格：HPLC≥98%,标准品CAS: 446-72-0
兔血管活性肠肽VIP定量检测试剂盒 Genistein 质量规格：≥98%,BRCAS: 446-72-0
兔糖胺聚糖GAG定量检测试剂盒 Geniposidic acid 质量规格：HPLC≥98%CAS: 27741-01-1
兔白细胞介素5IL-5定量检测试剂盒 Geniposidic acid 质量规格：HPLC≥98%,标准品CAS: 27741-01-1
人多瘤病毒7探针法荧光定量PCR试剂盒IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照)
主动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
Mo-MuLv/3T3细胞，Mo-MuLv感染的3T3细胞 人胰腺癌细胞,SFPAC-1细胞 CM-M056小鼠肾实质细胞完全培养基100mL
大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1
中国仓鼠卵巢细胞系;pDSr a2-mpl-X
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文献和实验做 real-time PCR之前，你应该如何着手设计引物？做哪些准备？看完必会！
过，你要先确定你选择哪个方法。如果你想用 Taqman Probe 法，请你选择 primer express 3.0。如果你想用 SYBR 法，我建议你选 primer premier 5.0。 为什么？请往下看。 3）两种引物设计软件之比较。 先说专门为 real-time PCR 定制的 primer express 3.0 。这个软件其实是为 Taqman 探针法设计的，而不适合SYBR染料法。 如果你用探针法，强烈推荐。打开软件就会发现，在方法选择的下拉菜单中
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个
实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法
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