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重组胰蛋白酶检测试剂盒
◆原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中胰蛋白酶的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板,制成固相抗体,往酶标板中加入标准品和检测样品,与检测抗体桥联结合,再加入辣根过氧化物酶标记物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算待测样品中胰蛋白酶的残留量。
◆特点
● 高灵敏度,能检测低至3.9 ng/mL的胰蛋白酶残留
● 采用双抗体夹心法,特异性更高,能检测猪来源的天然或重组胰蛋白酶
● 提供预包被的96孔板,检测更稳定
● 可拆卸的96孔板,操作更灵活
● 适用于重组蛋白药物残留检测
◆操作流程

◆产品信息
重组蛋白药物或融合表达工艺中,使用到了重组或提取的猪源胰蛋白酶进行酶切,可以以本试剂盒进行以检测样品中微量胰蛋白酶残留量。
| 样品类型 |
重组蛋白药物 |
| 检测范围 |
3.9 ng/mL~250 ng/mL |
| 检测对象 |
重组表达或猪源胰蛋白酶: imed 重组胰蛋白酶(产品编号:RTP0102):重组胰蛋白酶 imed 重组胰蛋白酶(产品编号:RTP0103):重组胰蛋白酶 imed 重组胰蛋白酶(产品编号:RTP0104):重组胰蛋白酶 |
| 特点 |
● 可进行定量检测 |
| 有效期 |
12个月 |
◆产品列表
| 产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
| RTrypsin ELISA Kit |
96 wells |
◆相关产品
| 产品编号 |
产品名称 |
规格 |
比活 |
| RTrypsin |
10 mg |
3800 USP/mg |
|
| RTrypsin |
1 mg |
3800 USP/mg |
|
| RTrypsin |
10 μg |
3800 USP/mg |
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文献和实验样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
样品:重组胰蛋白酶,比活 4000USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适温度的研究 将底物 BAEE(0.25 mM)分别置于 4℃、15℃、20℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃ 和 70℃ 水浴中温浴 20 min,加入相同体积的 RPT 酶液测定 rPT 的活力,结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。 2. 温度稳定性的研究 取
用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标
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