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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
35
- 英文名：
Enterococcus casseliflavus
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品及特点:
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是公司正在促销打折产品：
Brucella Broth Supplement 2ml/支*5 布氏肉汤添加剂（2ml/支）
Brucella Broth Additive 2ml*5 布氏肉汤添加剂
Brucella Broth 10个/包 含225ml布氏肉汤均质袋
Brucella Broth 250g 布氏肉汤
Brucella Agar 250g 布氏琼脂
Brucella Agar 250g 布鲁氏菌培养基
Broth medium G(MacConkey broth) 250g 肉汤培养基G
Cyclin H 周期素H抗体 特价促销
Cyclin J 周期素J抗体 特价促销
Cyclin K/CCNK 周期素K抗体 特价促销
Cyclin L/CCNL1 周期素L抗体 特价促销
Cyclin M2/CNNM2 周期素M2抗体 特价促销
Cyclin T2 周期素T2抗体 特价促销
Cyclooxygenase 1/COX1 前列腺素氧环酶1抗体 特价促销
Cyclooxygenase 2/COX2 前列腺素过氧物合成酶2抗体 特价促销
Cyclooxygenase 3/Cox3 前列腺素过氧物合成酶3抗体 特价促销
Cyclophilin B 亲环蛋白PPIB抗体 特价促销
HSP90 Antibody （Heat shock 90 kDa protein 1A/1B， Heat shock 90 kDa protein 1/2， HSP90-1/HSP90-2， HSPA1A， HSPA1， HSPA1B） HSP90抗体
Hsp70 Antibody，HSPA4，APG2，APG-2，HSP70RY，HS24/P52，MGC131852，hsp70RY Hsp70抗体
Hsp70 Antibody，HSPA4，APG2，APG-2，HSP70RY，HS24/P52，MGC131852，hsp70RY Hsp70抗体
HSP70 antibody HSP70抗体
Hsp60 Antibody，HSPD1，HuCHA60，chaperonin，CPN60，SPG13，HSP65，Hsp60，GROEL，HSP-60，HSP60 Hsp60抗体
Hsp47 Antibody ，SERPINH1，AsTP3，CBP1，CBP2，HSP47，PIG14，RA-A47，PPROM，colligen，colligin-2，SERPINH2 Hsp47抗体
Hsp27 Antibody，HSPB1，CMT2F，DKFZp586P1322，HS.76067，HSP27，HSP28，Hsp25 Hsp27抗体
Hsp27 Antibody，HSPB1，CMT2F，DKFZp586P1322，HS.76067，HSP27，HSP28，Hsp25 Hsp27抗体
Hsp105 Antibody，HSP 110 family，HSP 105 famioy，heat shock protein Hsp105抗体
HSF1 Antibody，HSF-1，HSF 1，Heat shock factor 1，Heat shock transcription factor 1，HSTF1，HSTF 1 HSF1抗体
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒西蒙氏枸橼酸盐琼脂250克Simmons Citrate Agar用于肠道菌的柠檬盐利用试验
克氏柠檬酸盐培养基250克Christensen Citrate Medium肠杆菌鉴别
乳糖胆盐发酵管培养基250克Lactose Ferment Broth用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
SC增菌液250克Selenite Cystine Broth沙门氏菌选择性增菌培养
SE增菌液250克Selenite Enrichment Medium增殖标本中的沙门氏菌
亮绿琼脂250克Brilltant Green Agar沙门氏菌分离培养
原代滑膜皮细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代骨骼肌细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代神经元细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代神经胶质细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代单核细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代软骨细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
| 产品名称 | 铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Enterococcus casseliflavus |
| 编号 | EY00P3968 |
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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HSP90 Antibody （Heat shock 90 kDa protein 1A/1B， Heat shock 90 kDa protein 1/2， HSP90-1/HSP90-2， HSPA1A， HSPA1， HSPA1B） HSP90抗体
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Hsp70 Antibody，HSPA4，APG2，APG-2，HSP70RY，HS24/P52，MGC131852，hsp70RY Hsp70抗体
HSP70 antibody HSP70抗体
Hsp60 Antibody，HSPD1，HuCHA60，chaperonin，CPN60，SPG13，HSP65，Hsp60，GROEL，HSP-60，HSP60 Hsp60抗体
Hsp47 Antibody ，SERPINH1，AsTP3，CBP1，CBP2，HSP47，PIG14，RA-A47，PPROM，colligen，colligin-2，SERPINH2 Hsp47抗体
Hsp27 Antibody，HSPB1，CMT2F，DKFZp586P1322，HS.76067，HSP27，HSP28，Hsp25 Hsp27抗体
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Hsp105 Antibody，HSP 110 family，HSP 105 famioy，heat shock protein Hsp105抗体
HSF1 Antibody，HSF-1，HSF 1，Heat shock factor 1，Heat shock transcription factor 1，HSTF1，HSTF 1 HSF1抗体
铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒西蒙氏枸橼酸盐琼脂250克Simmons Citrate Agar用于肠道菌的柠檬盐利用试验
克氏柠檬酸盐培养基250克Christensen Citrate Medium肠杆菌鉴别
乳糖胆盐发酵管培养基250克Lactose Ferment Broth用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
SC增菌液250克Selenite Cystine Broth沙门氏菌选择性增菌培养
SE增菌液250克Selenite Enrichment Medium增殖标本中的沙门氏菌
亮绿琼脂250克Brilltant Green Agar沙门氏菌分离培养
原代滑膜皮细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代骨骼肌细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
原代神经元细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
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原代单核细胞培养特制添加剂 规格:5/2.5/1ml
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文献和实验相关实验
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同，定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化，得到的结果是百分比；绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同，荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言，探针杂交技术在原理上更为严格，所得数据更为精确；荧
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