
GB-Mut定点突变试剂盒
- ¥1080 - 4125
- GBI
- GB3001
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
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大量
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12/24/48个反应/12反应/24反应/48反应
| 规格: | 12/24/48个反应 | 产品价格: | ¥1080 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 12反应 | 产品价格: | ¥1080 |
| 规格: | 24反应 | 产品价格: | ¥2115 |
| 规格: | 48反应 | 产品价格: | ¥4125 |
定点突变作为基因研究中的有力工具,可广泛应用于基因和蛋白质功能的研究。GB定点突变试剂盒采用热启动高保真DNA聚合酶,通过PCR扩增指数型获得突变DNA片段,由技术将其插入目的载体。此方法可以实现各种DNA的点突变、插入或缺失。
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文献和实验领域很广,比如研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性,改造启动子或者DNA作用元件,提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构,以及药物研发、基因治疗等等方面。 对于单点突变,Stratagene公司的QuikChange Site-directed Mutagenesis kit是不错的选择,通过巧妙设计,将质粒定点突变技术变得简单有效。准备突变的质粒必须是从常规E.coli中经纯化试剂盒(Miniprep)或者氯化铯纯化抽提的质粒。设计一对包含突变
A1和B2以及 TAQ酶,这样做的好处是可以得到特异的扩增,缺点是麻烦。另外一种方法是将引物,双模板,酶,dntp等所有的反应成分均一起加入PCR管,进行反应, 好处是节省时间,不太麻烦。 目前重叠PCR的应用十分广泛,比如说在基因的定点突变,虽然说现在有很多的突变试剂盒,应用起来也很简单,但那是需要银子的;人工合成 基因,其实人工合成基因最基本的技术(目前应用最为广泛的)就是利用重叠PCR的方法;启动子与目的基因的串连;两个不同表达盒的连接,大家都知道我们在使用DNA调取或者说
。 一般来说,如果是胞内表达,应尽量用Mut-细胞,这样得到的蛋白产物中醇氧化酶蛋白量较少而目的蛋白量相对较多(约占Pp总分泌蛋白量的30-90%,如人乙酰胆碱酯酶B变异链的含量占到90%,使下游纯化更易进行。而对于分泌蛋白的表达,无论是甲醇利用慢 (Mut-)还是甲醇利用快(Mut+)的细胞都可应用,如在人血清白蛋白(HSA)(为分泌型蛋白)的表达中就看不出两种类型的细胞之间有什么明显差别。 所以一般手册都会建议同时在这几种菌株中进行转化,这主要是因为不同的基因在不同的酵母菌中可能表达量截然
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