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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
335
- 英文名:
pET-N-His-TEV Plasmid
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
1μg|100μg
特别提示:包括pET-N-His-TEV质粒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:pET-N-His-TEV质粒
英文名称:pET-N-His-TEV Plasmid
产品货号:YT976
产品规格:1μg|100μg
pET-N-His-TEV是一种用于表达N端含有His标签(His tag)的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有TEV酶切位点,可通过TEV Protease(货号:YT984)切除N端的His标签。本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面,带有一个His标签的编码序列,含有6个组氨酸(6X His)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。
本载体在N端His标签与多克隆位点之间含有TEV蛋白酶(TEV Protease)识别的七肽序列ENLYFQG,对应的核酸序列为GAGAACCTGTACTTCCAAGGG,因此可在目的蛋白纯化后用TEV蛋白酶切除N端His标签。TEV蛋白酶酶切发生在七肽序列的Q和G之间,因此在酶切去除His标签的时候目的蛋白的N端会留下一个额外的氨基酸残基G。
通常可以采用如GoldBalb His-tag Purification Resin(货号:YT616)或His标签蛋白纯化试剂盒(货号:YT046)等纯化本质粒表达的目的蛋白,也可以使用His-tag抗体(货号:YT789)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
pET-N-His-TEV质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| 1 origin | 12-467 |
| Kanamycin resistance ORF | 563-1645 |
| PBR 322 origin | 2084 |
| LacI coding sequence | 3518-4597 |
| T7 promoter | 4988-5004 |
| His tag coding sequence | 5079-5096 |
| TEV Protease recogniton site sequence | 5097-5117 |
| Multiple cloning site(BamHI-XhoI) | 5118-5165 |
| T7 Terminator | 5251-5297 |
pET-N-His-TEV质粒(5304bp)的图谱如下:
pET-N-His-TEV质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 primer(4988-5004):5′-TAATACGACTCACTATA-3′
pET-R primer(5218-5237):5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
使用说明:
1.首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pET-N-His-TEV质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。
我公司销售的pET-N-His-TEV质粒价格,pET-N-His-TEV载体质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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pET-N-His-TEV质粒价格
¥380 - 3800









