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- 汉恒生物
- HB-SLR-100
- 中国
- 2026年07月17日
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- 详细信息
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充足
- 英文名：
HBLumi Luciferase（Firefly） Reporter Assay kit
- 保质期：
-20℃可保存半年，-80℃可保存一年
- 供应商：
汉恒生物科技（上海）有限公司
- 保存条件：
-20℃或-80℃
- 规格：
100rxns
产品概述
单荧光素酶检测系统是一种基于生物发光的基因表达分析工具，它通过一种荧光素酶（主要是萤火虫荧光素酶）催化底物产生可量化的光信号，来研究基因调控元件的活性。由于它仅使用单一报告基因，所以在分析和操作上都非常直接，尤其适合用于高通量筛选等场景。
该试剂盒操作简单、检测迅速、灵敏度高，已广泛应用于转录因子与启动子互作验证、miRNA靶基因功能研究、lncRNA/circRNA调控机制探究等众多领域。
荧光素酶简介
荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物发光反应的酶的总称。在双荧光素酶报告系统中，最常用的两类荧光素酶分别来源于萤火虫（Photinus pyralis）和海肾（Renilla reniformis）：
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酶类型 |
英文名 |
分子量 |
催化底物 |
发光特征 |
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萤火虫荧光素酶 |
Firefly Luciferase（F-Luc） |
61 kDa |
D-荧光素（D-Luciferin） |
强发光，作为报告基因 |
|
海肾荧光素酶 |
Renilla Luciferase（R-Luc） |
36 kDa |
腔肠素（Coelenterazine） |
稳定发光，作为内参 |
两种荧光素酶催化底物产生的荧光强度与酶的表达量成正比，可通过光度计/酶标仪精确定量。
实验原理
萤火虫荧光素酶（firefly luciferase, fluc）和海肾荧光素酶（renilla luciferase, rluc）可分别催化荧光素（luciferin）和腔肠素（coelenterazine）产生生物荧光反应，反应过程如下图所示。
在双荧光素酶反应中，首先用Luciferase Reaction Reagent检测fLuc信号；随后，直接加入Luciferase Reaction Reagent II，将fLuc的信号猝灭，同时产生rLuc信号。该方法具有操作简单、检测快捷、灵敏度高等优点。
如需查看完整、详细的产品使用说明，欢迎登录汉恒生物官网（www.hanbio.net），在[资源中心]板块获取【试剂说明书】双荧光素酶检测试剂盒。
产品特点
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特点 |
描述 |
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操作简便 |
两步法顺序检测，无需更换样品，操作流程清晰 |
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检测快捷 |
试剂预处理简单，整体检测耗时短 |
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灵敏度高 |
可检测弱启动子及低表达水平，灵敏度出色 |
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线性范围宽 |
定量范围广，适用于不同表达水平的研究体系 |
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兼容性强 |
适配多种细胞类型和常用报告载体（如 psiCHECK2） |
试剂盒组成
（100 rxns 规格）
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组分名称 |
规格 |
说明 |
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Lysis Buffer（5×） |
10 mL |
5倍浓缩细胞裂解液，使用前稀释至1× |
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Luciferase Reaction Buffer |
10 mL |
萤火虫荧光素酶反应缓冲液 |
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Luciferase Reaction Substrate |
1管（冻干型） |
萤火虫荧光素酶底物（干粉），溶于Buffer后使用 |
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Luciferase Reaction Buffer II |
10 mL |
海肾荧光素酶反应缓冲液II |
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Luciferase Reaction Substrate II |
80 μL（125× 浓缩液） |
海肾荧光素酶底物，稀释后使用 |
主要应用领域
1. miRNA 靶基因验证
将 miRNA 潜在结合位点（约500 bp 的3'UTR区段）克隆至报告载体（如 psiCHECK2）F-Luc 的下游，与 miR mimics 共转染细胞后，通过双荧光素酶活性变化验证 miRNA 与靶基因的结合关系。
2. 转录因子与启动子互作研究
将目标启动子序列克隆至荧光素酶报告载体上游，检测特定转录因子对靶启动子转录活性的激活或抑制作用。
3. lncRNA / circRNA 功能研究
利用"分子海绵"机制，验证 lncRNA 或 circRNA 对 miRNA 的吸附作用，揭示 ceRNA 调控网络。
4. 基因调控元件功能解析
研究增强子、沉默子等调控元件的活性，以及药物或信号通路对基因表达的调控机制。
5. 报告基因定量检测
凡是利用萤火虫-海肾双报告系统进行的蛋白质互作、病毒感染效率、CRISPR 编辑效率等各类定量研究。
相关产品与服务
汉恒生物除提供试剂盒外，还提供完整的双荧光素酶研究解决方案：
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产品/服务 |
说明 |
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荧光素酶（Firefly）检测试剂盒 |
单荧光素酶报告基因定量检测 |
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双荧光素酶检测服务 |
全程外包，含载体构建、转染、检测、数据分析 |
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慢病毒/AAV包装服务 |
可稳定表达报告基因，适合难以瞬转的细胞 |
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miRNA/lncRNA靶基因验证服务 |
含双荧光素酶验证完整实验方案 |
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转染试剂 |
多种细胞适用的高效转染试剂 |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验[1]Chen H, Li M, Xie F, et al. A novel protein cPFKFB4 encoded by hsa_circ_0065394 strengthens PKM2-mediated glucose metabolic reprogramming to facilitate pancreatic cancer progression under hypoxia. Mol Cancer. 2025;24(1):285. Published 2025 Nov 11.
（杂志:Molecular Cancer，IF=33.9，重庆大学重庆总医院）
[2]Li S, Lv J, Li Z, et al. Overcoming multi-drug resistance in SCLC: a synergistic approach with venetoclax and hydroxychloroquine targeting the lncRNA LYPLAL1-DT/BCL2/BECN1 pathway. Mol Cancer. 2024;23(1):243. Published 2024 Oct 31.
（杂志:Molecular Cancer，IF=27.7，首都医科大学）
[3]Zhou J, Wang S, Lou J, et al. FGF4-FGFR1 signaling promotes podocyte survival and glomerular function to ameliorate diabetic kidney disease in male mice. Nat Commun. 2025;16(1):10430. Published 2025 Nov 25.
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[4]Wang F, Li S, Kong L, et al. Tensile Stress-Activated and Exosome-Transferred YAP/TAZ-Notch Circuit Specifies Type H Endothelial Cell for Segmental Bone Regeneration. Adv Sci (Weinh). 2024;11(12):e2309133.
（杂志:Advanced Science，IF=15.1，上海交通大学附属上海第六人民医院）
[5]Xie Y, Peng Y, Qin T, et al. AGAPIR: A Novel PIWI-Interacting RNA Enhancing Post-Decompression Angiogenesis in Degenerative Cervical Myelopathy. Adv Sci (Weinh). 2025;12(42):e04246.
（杂志:Advanced Science，IF=14.1，深圳市人民医院）
1、双荧光素酶实验原理； 2、验证转录因子与启动子互作； 3、验证miRNA与mRNA互作
性地区别这两种发光报告基因的活力。萤火虫荧光素酶是一个61kDa单亚基蛋白质，酶活力不需翻译后修饰，在翻译后即可作为遗传报告基因。在ATP，Mg2+ 和 O2存在下，通过甲虫荧光素的氧化反应发光（图1）。在常规反应条件下，荧光素的氧化发生时，以荧光素-AMP作为中间体，转换非常缓慢。结果，在底物和酶混合后，测试化学产生“闪烁”的光，并迅速衰减。专利化的测试试剂，定量萤火虫荧光素酶活力，掺入了辅酶A（CoA）， 增强快速酶转换来提高反应动力学， 导致持续的“闪烁”发光信号 （图2） 。 图1 由萤火
好像现在比较常用的是双报告基因检测吧，可以解决你说的问题 huxueliang 利用双荧光素酶报告基因系统 同时转入内参质粒 天飒 huxueliang 麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ，同时转入内参质粒吧，我是一名新手这方面知道的少，谢谢啦！ 叮当儿 promega公司的双荧光素酶标记系统，好多人都在用，同时转入要检测的报道基因及Renillia，操作的话说明
