【试用装】抗支原体试剂

汉恒SaveIt^TM抗支原体试剂：拯救细胞状态，抗击细胞黑点！

图片说明：H9C2细胞和MEF细胞培养中出现小黑点时的状态

即使是支原体未大量爆发，潜伏的支原体污染严重影响细胞的功能表型，支原体严重影响细胞的分化方向，扰乱细胞的增殖、活力与代谢水平。支原体污染还严重降低细胞的基因转染效率，无论是病毒感染还是脂质体转染都逃脱不了效率低下的命运。

产品简介

汉恒生物推出的SaveIt^TM抗支原体试剂能够在不影响细胞状态的前提下有效的清除支原体污染，从而使一些珍贵的细胞得到挽救。




汉恒生物实例

向已经污染支原体的细胞中加入抗支原体试剂 SaveIt^TM 后，再用PCR检测培养细胞的支原体，电泳图如下。结果显示，加入汉恒生物抗支原体试剂后，污染的支原体被有效清除清除。


支原体简介

支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。

支原体是在1898年发现的，又称人形支原体，是一种简单的原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。结构也比较简单，多数呈球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜，故具有较大的可变性。支原体的大小为0.2～0.3um,可通过滤菌器，常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小（直径0.1~1.0mm），在固体培养基表面呈特有的"油煎蛋"状。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。




关于细胞（特别是传代细胞）在培养过程中被支原体污染，这是一个世界性的问题。国内外研究表明，95%以上污染细胞的支原体属于以下四种类型：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii，此种支原体为牛源性）。这是四种最常见的污染细胞的支原体菌群，但实际中能够污染细胞的支原体的种类是很多的。国外的调查证明，有二十多种支原体可以污染细胞，并且有的细胞可以同时被两种以上的支原体污染。


支原体是最小的可体外生长的微生物,可长期与宿主细胞共同生长,不产生急性细胞毒作用,在实验中容易被忽视。目前在细胞培养过程中有70%以上都存在支原体污染的情况。细胞受到支原体污染后不仅会影响细胞内某些基因的表达，也会在一定程度上影响细胞的生长状态。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

在细胞培养过程中应当定期做支原体检测，万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。但是若受污染的细胞比较珍贵，必须去除支原体污染，则可以通过混合使用抗生素以达到目的。支原体没有细胞壁的，传统的抗生素一般对其无效。培养细胞支原体污染虽然不对细胞产生急性毒性作用,但可使细胞性状发生改变而影响细胞脂质体的转染和病毒对靶细胞的感染。包装细胞与靶细胞支原体污染的有效清除能明显改善病毒包装时的转染效率及靶细胞感染效率。


支原体污染对细胞的影响：

1、影响细胞的生长状态及形态

支原体可使培养液中支持细胞生长的营养物质含量减少，造成细胞生长缓慢甚至停止；另外还会导致细胞微管解聚，引起细胞一系列细胞病变，表现为细胞收缩、贴壁细胞脱落、裂解等。

2、影响细胞的代谢和功能

（1）培养液中的精氨酸被支原体大量消耗，引起细胞蛋白质、DNA、rRNA、mRNA的合成障碍，导致细胞的分裂和生长受阻；

（2）支原体活动是培养液成分发生改变（如发酵型支原体降解糖类产生酸性物质），影响细胞代谢；

（3）支原体吸附在细胞表面，破坏细胞膜的完整性，影响细胞信号传递；

（4）消耗细胞的核苷库，引起细胞染色体异常；

（5）引起细胞酶谱改变；

（6）在单克隆抗体制备中，骨髓瘤或杂交瘤细胞因支原体的污染而导致融合失败或抗体分泌能力下降以至丧失。

3、引起染色体异常

改变染色体组型，通常可导致细胞染色体断裂、数目减少，出现双着丝点染色体、环状染色体等。

4、对免疫细胞产量的影响

支原体能影响巨噬细胞的活性，抑制干扰素的合成和降低其活性，加大了继发感染其他细菌和病毒的几率，同时，通过植物血凝素干扰淋巴细胞的刺激、分化。

5、其他

此外，支原体污染还会影响一些病毒在细胞中的产量、使恶性细胞致癌能力下降、影响淋巴细胞分化等。