超敏化学发光底物(A液+B液)

中文名称：超敏化学发光底物(A液+B液)
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
产品保存：4℃密封避光保存，一年有效
产品说明：Western blot 底物发光检测试剂是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用独特的发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通 ECL 试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对×光胶片曝光，也可直接进行 lμminometer 检测或者荧光 CCD 扫描。
产品特点：
1．高信噪比，背景低。
2．发光迅速。
3．可在日光灯下进行发光操作。
4．灵敏度高：可检测 femto 级抗原。
5．发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复 Western blot。
6．节约抗体，包括一抗二抗。超敏化学发光检测试剂因灵敏度高，可使用较高抗体稀释比例。一抗稀释 1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/ml ；二抗稀释 1:20000-1:100000或10-50ng/ μl。
使用方法：
1．执行常规 SDS－PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。
2．膜的封闭:用 TBS-T 液洗涤印迹膜 10minX2。放入 5%脱脂奶粉封闭液内，摇床震动，室温封闭1小时。
3．一抗孵育：去除封闭液，并加入稀释好的一抗，用摇床震动，室温孵育2h或4℃孵育过夜。
注意：最好使用推荐的一抗稀释比例，稀释一抗使用封闭液稀释。
4．用 4-6倍 TBS-T洗涤印迹膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次数可降低背景。
注意：洗涤之前，用 TBS-T洗液将印迹膜进行简单的漂洗，将会增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：将一抗孵育后的印迹膜放入适当稀释的HRP 标记的二抗中孵育，摇床震动，室温孵育2 小时。
注意：最好使用推荐的HRP 标记二抗的稀释比例，稀释二抗使用封闭液稀释。
6．重复第 4 步，以去除非特异性 HRP 标记二抗的结合。
注意：与 HRP 标记二抗孵育后，必须彻底地清洗印迹膜。
7．制备工作液：按每 1 ml 蒸馏水加 A 液和 B 液各 50μι，混匀组成作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm2膜需要大约1ml工作液。
8．将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液。
9．将印迹膜与工作液孵育1-5min。
注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行胶片曝光。
10．将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡。
11．在暗室中取一张×胶片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分钟，立即显影定影。
注意：根据其发光的强度,缩短或延长×片的曝光时间(对微弱信号，曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。使用说明 
    1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。 
    2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。 
    3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物； 
    4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；   
    5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。  
    6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。

超敏化学发光底物(A液+B液) 使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
ZMYND10 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
PMP2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
ERMP1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
FHOD1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
RASA3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
RAB21 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
BCL6B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
PLEKHG6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
TGM5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
USP21 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
DEFA5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
HTR2A rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
GIPR rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
UBE2Q2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
FGR rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol盐酸水苏碱(标准品)  分子式：C14H16O9  性状：Powder  纯度：98.5%
(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol异水飞蓟宾(分析标准品,≥98%)  分子式：C24H26O14  性状：Powder  纯度：%
D-arabinitol3,3’-二没食子酸酯茶黄素(分析标准品,≥98.0%(HPLC))  分子式：C16H20O9  性状：Powder  纯度：98.5%
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone巴马汀氯化物一水合物(分析标准品)  分子式：C22H26O11  性状：Powder  纯度：%
12-Hydroxyjasmonic acidBSA[=N,O-双(三甲基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))  分子式：C22H16O9  性状：Powder  纯度：98.0%
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanolBSTFA[=N,O-双(三甲基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于气相色谱)
  分子式：C19H18O8  性状：Cryst.  纯度：98.0%
Decanedioic acidTMS-咪唑(=N-三甲基硅基咪唑)(>98.0%(T))  分子式：C23H32O4  性状：Powder  纯度：98.5%
2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetateN,O-双(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))  分子式：C13H12O4  性状：Powder  纯度：98.0%
Momor-cerebroside IN-甲基-N-三甲硅基乙酰胺(>92.0%(GC))  分子式：C22H26O12  性状：Powder  纯度：%
超敏化学发光底物(A液+B液) 中文名称  磷酸二酯酶5A抗体
别    名  5''-cyclic phosphodiesterase; CGB PDE; CGB-PDE; CGBPDE; cGMP binding cGMP specific 3' 5' cyclic nucleotide phosphodiesterase; cGMP binding cGMP specific 35 cyclic nucleotide phosphodiesterase; cGMP binding cGMP specific phosphodiesterase; cGMP binding/cGMP specific phosphodiesterase; cGMP specific 3'5' cyclic phosphodiesterase; cGMP specific phosphodiesterase PDE5A2; cGMP specific phosphodiesterase type 5A; cGMP-binding cGMP-specific phosphodiesterase; cGMP-specific 3'; CN5A; CN5N; PDE 5; PDE 5A; PDE5; Pde5a; PDE5A_HUMAN; PDE5A1; Phosphodiesterase 5A; Phosphodiesterase 5A cGMP specific; Phosphodiesterase isozyme 5.
浓    度  1mg/1ml
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal
交叉反应  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Guinea Pig
产品类型  一抗
研究领域  肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导 新陈代谢
蛋白分子量  predicted molecular weight: 100kDa
性    状  Lyophilized or Liquid
免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDE5A
亚    型  IgG
纯化方法  affinity purified by Protein A
储 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.