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封闭液(用TBS配置,含吐温20)

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  • 上海一研
  • EY-24226
  • 进口、国产
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Blocking Buffer(TBS)

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      100ml

    中文名称:封闭液(用TBS配置,含吐温20)
    英文名称:Blocking Buffer(TBS)

    产品规格:100ml
    发货周期:1~3天
    本品是最新一代的快速高效封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品配制在TBS中,含有适当浓度Tween-20。 按照每张膜封闭需要5-10ml封闭液计算,一个包装的本产品 可以封闭10-20张膜。
    本封闭液快速高效。封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比,显示出更强的信噪比(参考下图)。
    本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比。
    本封闭液兼容性好,兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。
    本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Tween-20的TBS中,可以直接用于相关实验,但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。
    注意事项:
    1. 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗,例如一些内参抗体,本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用 过的封闭液混合。
    2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也 完全可以4℃封闭过夜。
    3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
    4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
    5. PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异 常背景。
    储存条件:4℃,有效期一年。使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。

    产品细节图片1
    封闭液(用TBS配置,含吐温20) 使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    RBMS1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul

    NSD1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    SNX15 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    SLC16A1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    CSMD1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    GPT rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
    SLC27A2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    S100A14 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    ADRB1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    LAMA5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    ITGAX rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    HAUS7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    TPST2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    IGFBP1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    ADM2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
    Fraxin黄决明素  分子式:C16H16O4  性状:Powder  纯度:98.5%

    Toddalolactone肉豆蔻醚(标准品)  分子式:C16H12O6  性状:Powder  纯度:98.0%
    (+)-Mellein卡枯醇  分子式:C21H22O11  性状:Powder  纯度:98.0%
    4'-O-MethylcoumestrolL-细辛脂素(标准品)  分子式:C19H18O8  性状:Yellow powder  纯度:%
    Coumarin吉托皂苷元(标准品)  分子式:C30H22O10  性状:Yellow powder  纯度:98.0%
    7-Methoxycoumarin异甘草素  分子式:C16H14O4  性状:Powder  纯度:98.0%
    6-Methylcoumarin异甘草素(标准品)  分子式:C18H16O8  性状:Yellow powder  纯度:98.5%
    Notopterol人参皂苷Re(标准品)  分子式:C16H14O7  性状:Powder  纯度:97.0%
    Columbianadin人参皂苷F4,人参皂苷Rg4  分子式:C15H12O6  性状:Powder  纯度:98.0%
    封闭液(用TBS配置,含吐温20) 中文名称  死亡结构域蛋白NRH2抗体

         NRADD; PLAIDD;  
         1mg/1ml
     0.2ml/200μg
    抗体来源  Rabbit  
    克隆类型  polyclonal
    交叉反应  Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep
    产品类型  一抗    
    研究领域  细胞生物 细胞凋亡  
    蛋白分子量  predicted molecular weight: 24kDa
         Lyophilized or Liquid
     KLH conjugated synthetic peptide derived from rat NRH2
         IgG
    纯化方法  affinity purified by Protein A
     Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
    产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500
    (石蜡切片需做抗原修复)
     not yet tested in other applications.
     optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  
    保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
    Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

     

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    相关实验
    • 关于BSA封闭液的使用方法大讨论

      一般也具有保护作用。 C、新生牛血清(细胞培养时候加到1640的那一种)可以么,用多大的浓度配比较好啊,是用双蒸水配吗?? Q1、5%,TBS配,BSA是牛血清蛋白,粉剂,不是牛血清哦 Q2、如果不是用biotin-avidin系统的话,用5%脱脂奶粉做封闭液就可以了,廉价,效果也很好。 Q3、封闭液一般是用5%的BSA或者是用5%的脱脂奶粉,溶剂一般使用TBST。做实验的时候,我一直强调这样的一个原理,那就是在了解原理的基础之上,我们完全可以不拘泥于书本

    • ELISA实验中的封闭液等常用试剂的配制

      ELISA实验中的封闭液小知识 ELISA的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点,蔗糖封闭的原理: 1. ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用; 2. 封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。 3. 加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用。 4. 蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭

    • 缓冲液配制指南

      使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS

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