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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
79
- 英文名:
Thermostable M-MuLV reverse transcriptase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
5000U|10000U
特别提示:包括耐热M-MuLV反转录酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:耐热M-MuLV反转录酶
英文名称:Thermostable M-MuLV reverse transcriptase
产品货号:ALH260
产品规格:5000U|10000U
本品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。 同时经过多点突变,提高了反转录温度耐受性,可以在45-55℃进行反转录(更高温度反转时活性会部分减低)。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时更高的反转录温度大大的提高了GC含量高,二级结构丰富的RNA模板的反转录效率。本酶浓度为200 units/μl
试剂盒组分(5000U):
M-MuLV(RNase Hˉ)(200U/μl)-————5000U
5×RT Buffer————————————500μl
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
储存条件:-20℃。
本制品别名:不带RNase H活性反转录酶|耐热反转录酶|RNase H活性缺失的耐热M-MuLV反转录酶
我公司销售的耐热M-MuLV反转录酶北京价格,耐热反转录酶,RNase H活性缺失的耐热M-MuLV反转录酶,不带RNase H活性反转录酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验-MULV反转录酶 1 μL 置于 42℃水浴,1h。 ③ 70℃保温5min(使酶失活)。 ④ 于-20℃保存备用。 PCR 扩增目的基因 以反转录产物为模板,克隆引物B1,B2为引物,利用rTaq酶进行扩增目的基因,用于后续连入克隆载体的操作,然后再以表达引物EB1,EB2为引物,利用Pfu DNA聚合酶进行扩增目的基因,用于后续连入表达载体的操作。 94 ℃ 3 min 94 ℃ 45Sec
混合后,70℃水浴5 min(破坏二级结构),再冰浴5min。 ② 在管中依次加入 (反应体系为20 μL): RT 5×buffer 4μL RNasin 1μL dNTP ( 10mM) 2μL 混匀,37℃ 5min。 M-MULV反转录酶 1 μL 置于 42℃水浴,1h。 ③ 70℃保温5min(使酶失活)。 ④ 于-20℃保存备用。 PCR 扩增目的基因
基因或克隆DNA片段没有多大用处。 二、甲基化酶 细胞的限制-修饰系统中的修饰作用是由甲基化酶(methylase)来完成的。甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别顺序。甲基化酶使识别顺序中的某个碱基发生甲基化,保护DNA不被限制性内切酶切开。 真核生物中目前只发现5-甲基胞嘧啶(M5C)。M5C占整个胞嘧啶中的2~7%(果蝇和某些昆虫例外)。M5C大多以M5CpG的形式存在,不同物种或同一物种的不同组织中,M5C出现的频率也不尽相同。目前已经纯化作为商品出售的甲基
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