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- 2025年07月12日
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- 详细信息
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20
- 英文名：
NADP-malate dehydrogenase detection kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
100管/96样
英文名称：NADP-malate dehydrogenase detection kit
产品规格：100管/96样
发货周期：1～3天
测定意义:
MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH， NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理：
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒(微量法) 使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
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文献和实验催化 L-苹果酸脱氢变成草酰乙酸的酶。 EC1． 1． 1． 37。以 NAD 作为电子受体。广义上也包括以 NAD 或 NADP 作为受体而生成丙酮酸和碳酸的苹果酸酶（ EC1． 1． 1． 38— 40）。与 NADP 也有弱反应，也可将其它羟酸脱氢。广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上，为三羧酸循环中的一种酶。由于酶的来源不同，其某些性质也不一样。
为催化苹果酸脱羧反应的酶。正式名称称为苹果酸脱氢酶（脱羧作用）。已知有三种苹果酸酶（ EC1． 1． 1． 38— 40）。其中以 NADP为受体的酶（ EC1． 1． 1． 40）催化生成下列反应： Δ G°′ =-0.36千卡。丙酮酸羧化反应（是 H． G． Wood和 C． H． Werkman， 1938最初发现的反应）中有的是苹果酸酶的作用，有的是丙酮酸羧化酶的作用，在生物体内已知以后者的作用为主。两者都是供给三羧酸循环中间体的补充反应
物；(3)这个三元复合物与HCO-3作用产生羧基磷酸与PEPC·Mg2+ 和烯醇式丙酮酸复合物，前者释放出CO2与Pi；(4)CO2与PEPC·Mg2+·烯醇作用产生OAA与PEPC·Mg2+ ，OAA为羧化反应的产物，PEPC·Mg2+ 则再次进行反应。PEPC是胞质酶，主要分布在叶肉细胞的细胞质中，分子量400 000，由四个相同亚基组成。PEPC无加氧酶活性，因而羧化反应不被氧抑制。 2.还原或转氨阶段 OAA被还原成苹果酸或经转氨作用形成天冬氨酸。 (1)还原反应 由NADP-苹果酸脱氢酶
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