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大量
- 英文名:
SDS-PAGE loading buffer,5×
- 保质期:
有效期 2个月
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
长时间储存于 2-8℃避光保存
- 规格:
5ml
产品介绍:
本产品适用于SDS-PAGE时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
储存条件-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。
使用说明:
1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、聚烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
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文献和实验一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解
【求助】提质粒后,跑电泳,用10乘Loading Buffer 还是6乘Loading Buffer?
ilovelc999 请问各位,提质粒后,用20微升TE溶解,然后进行电泳,应该用10乘Loading Buffer 还是用6乘Loading Buffer?另外Buffer与质粒溶液一般应以什么比例混合好呢?多谢各位啦! 纯属菜鸟 10乘 5:1的比例 质粒5 肥宝 我是用6X的,1:5,质粒5,不过也没那么严格,一般也就点个小点估计1ul lihuijin017
buffer:诱导前加30µl , 诱导后加50µl; f)沸水浴10min,煮完后以15000转离心10min,取上清液走电泳; g)对照菌同样操作; h)样品及mark和loading buffer都各取15µl点样,点样顺序按;对照菌诱导后、对照菌诱导前、工程菌诱导前、工程菌诱导后,一起走电泳的两组间点mark,最右边的泳道点loading buffer,走SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 5) 电泳 a) 将二块玻璃板制成的凝胶板上的夹子卸去,擦掉下沿两边角的凡士林。 b) 将凝胶板垂直
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