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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
292
- 英文名:
T7 Endonuclease I
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
250U|2500U
特别提示:包括T7核酸内切酶I在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T7核酸内切酶I
英文名称:T7 Endonuclease I
产品货号:MT0110
产品规格:250U|2500U
本制品识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。T7核酸内切酶I切割错配碱基 5′ 端的第一、第二或第三个磷酸二酯。本产品是通过克隆重组表达T7核酸内切酶I基因,获得的高纯度蛋白,该酶无其他内切酶或外切酶污染。
产品应用:
· 基因突变、SNP、TALEN或CRISPR/Cas9形成的突变体检测;
· 识别错配 DNA;
· 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA;
· 检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA;
· 随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆。
产品组成:
| 组分 | 250U | 2500U |
| T7 Endonuclease I(10U/μl) | 25μl | 250μl |
| 10×T7 Endonuclease I Buffer | 1 ml | 1ml×5 |
储存条件:-20℃,可保存2年,避免反复冻融。
单位定义:在 50μl反应体系,37℃条件下,1小时将90%以上的 1μg超螺旋十字型结构的 pUC(AT)* 转化成90%以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。
1×T7 Endonuclease I Buffer:50mM NaCl,10mM Tris-HCl,10mM MgCl2 ,1mM DTT(pH7.9 @ 25℃)。
贮存液:50mM Tris-HCl, 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH7.5。
注意事项:
1.T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶;该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物,必须控制酶量和反应时间。
2.反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
我公司销售的T7核酸内切酶I北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验限制和修饰现象在上个世纪中期被人们所发现,到 2005年1月,已经发现4342 种限制酶和甲基化酶,其中限制酶有3681 种。限制性内切酶有特定的识别位点和切割位点,切割后可产生平末端或粘性末端。酶切有标准的反应体系,受末端长度的影响,有位点偏爱性,在极端非标准条件下会产生星星活性。通过酶切连接可以增减酶切位点,酶切位点在基因组中的分布是不均匀的。大肠杆菌有三种甲基化酶和三种依赖于甲基化的限制系统。甲基化对限制酶切影响。基因操作常用的 DNA 聚合酶有大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ,T4、T7
。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
形DNA结构、Holliday结构等,故易出现假阳性;测序耗时长(1-3天),常常出现测序无信号等问题。 今年年初,Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶,它是一种具天然强活性的核酸内切酶,与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点,并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA,不会出现假阳性。 今年6月,Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒,该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除,尤其适用于ZFN
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