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菲优特检测
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小动物活体成像检测
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时
小动物活体成像是在生物体处于正常生理的活体状态下,利用生物发光(荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或DNA)或荧光标记(绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和FITC、Cy5、Cy7等荧光素及量子点(quantumdot,QD)进行标记)方式,结合高量子效率CCD,对小动物进行成像和分析,观察被标记动物体内分子、细胞等变化,可真实模拟生理病理状态下的生物学变化过程。
1. 荧光发光成像
荧光成像的标记对象较为广泛,可以是动物、细胞、微生物、基因,也可以是抗体、药物、纳米材料等。常用的有绿色荧光蛋白( GFP)、红色荧光蛋白( DsRed)及其它荧光报告基团,标记方法与体外荧光成像相似,荧光成像具有费用低廉和操作简单等优点。同生物发光在动物体内的穿透性相似,红光的穿透性在体内比蓝绿光的穿透性效率高,近红外荧光为成像观察的最佳选择。
2. 生物发光成像
活体生物荧光成像技术是指在小的哺乳动物体内利用报告基因-荧光素酶基因表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP发生氧化反应,将部分化学能转变为可见光能释放。然后在体外利用敏感的CCD设备形成图像。荧光素酶基因可以被插入多种基因的启动子,成为某种基因的报告基因,通过监测报告基因从而实现对目标基因的监测。
活体动物荧光成像技术应用领域
1. 肿瘤学
① GFP标记的肺肿瘤模型(H-460-GFP)
② 量子点标记细胞系
2. 抗体
3. 药学研究
4. 组织工程
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文献和实验小动物活体成像 主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这个系统,可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移、感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。传统的动物实验方法需要在不同的时间点宰杀实验动物以获得
,归功于分子生物学和细胞生物学的发展、转基因动物模型的使用、新的成像药物的运用、高特异性的探针、小动物成像设备的发展等诸多因素。目前,分子成像技术可用于研究观测特异性细胞、基因和分子的表达或互作过程,同时检测多种分子事件,追踪靶细胞,药物和基因治疗最优化,从分子和细胞水平对药物疗效进行成像,从分子病理水平评估疾病发展过程,对同一个动物或病人进行时间、环境、发展和治疗影响跟踪。2、分子成像的优点分子成像和传统的体外成像或细胞培养相比有着显著优点。首先,分子成像能够反映细胞或基因表达的空间
到裸鼠体内; Day 1, AM:8:00 注射; 2、 小动物活体成像观察: Day 1, PM:16: 00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 Day 2, AM:8:00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 Day 3, AM:8:00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 48 小时成像结束后,实验结束。 实验结果: 1、尾静脉注射 DIR-Exosome 8 小时后,小动物活体成像检测: 2、尾静脉注射 DIR-Exosome 24 小时后,小动物活体成像检测
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