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天津国晟中源科技有限责任公司
- 服务名称:
小动物活体成像实验
小动物活体成像实验
一、原理
活体成像技术是指应用影像学方法,在不损伤动物的前提下,对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究的技术。通过这项技术可以非侵入式、直观地观测活体动物体内肿瘤的生长,转移、疾病的发展过程、基因的表达变化等生物学过程。
目前活体成像技术主要采用生物发光与荧光两种技术,生物发光技术是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或者DNA,而荧光技术则是应用荧光蛋白(如GFP,RFP,Mcherry等)标记细胞或是蛋白等研究对象。其中生物发光技术因其操作简单,反应灵敏,在肿瘤,分子互作及信号传导等研究中得到了广泛应用。
二、成像效果:
活体成像效果
三、检测范围
1、肿瘤研究
肿瘤生长动态观察:通过标记肿瘤细胞,可以长时间监测肿瘤在体内的生长情况。
抗肿瘤药物疗效评价:通过观测给药后肿瘤光学信号的变化,可以评价不同药物、给药途径、时间和剂量对肿瘤的治疗效果。
转移模型建立:可以观测肿瘤在体内的转移路径和转移灶的形成。
2、炎症与免疫反应监测
通过标记特定细胞或分子,可以追踪体内炎症发生的位置及其程度变化,进而研究炎症和免疫反应的过程。
3、基因表达分析
4、药物动力学研究
可以帮助了解新药在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程。
5、神经科学研究
脑损伤后修复情况跟踪:可以观测脑损伤后神经组织的修复和再生情况。
神经退行性疾病模型中的病理特征可视化:如阿尔茨海默病、帕金森病等,通过标记疾病相关基因或蛋白质,可以观测疾病的发生发展和病理特征。
6、干细胞研究
监测干细胞的移植、存活和增殖:可以长期连续监测干细胞在活体动物体内的存活及增殖规律。
示踪干细胞在体内的分布和迁移:通过标记移植的干细胞,可以追踪其在宿主体内的分布和分化情况。
7、代谢性疾病模型
对于糖尿病、肥胖症等疾病的动物模型,可以通过该技术监测相关生物标志物的变化,从而研究疾病的发病机制和治疗效果。
8、感染性疾病模型
如细菌或病毒感染后,可以观测病原体在体内的扩散路径及宿主免疫应答,为感染性疾病的研究和治疗提供重要信息。
9、心血管系统功能评估
可以用于心肌梗死模型的建立、血管新生过程的研究等,为心血管疾病的诊断和治疗提供科学依据。
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文献和实验到裸鼠体内; Day 1, AM:8:00 注射; 2、 小动物活体成像观察: Day 1, PM:16: 00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 Day 2, AM:8:00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 Day 3, AM:8:00 小动物活体成像观察,全身和颅内(重点)。 48 小时成像结束后,实验结束。 实验结果: 1、尾静脉注射 DIR-Exosome 8 小时后,小动物活体成像检测: 2、尾静脉注射 DIR-Exosome 24 小时后,小动物活体成像检测
体,所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管,利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、DiR 碘化物(DiR 染料)的发射波长肉眼不可见,需要使用配备 CCD 镜头或其他设备的近红外检测仪器,建议使用活体成像仪。 e、建议染料标记的外泌体注在射后 24h 内设置梯度时间进行观测,多数情况注射后 2-8小时荧光强度达到峰值。为保证观察结果,小动物需要做剃毛处理。 f、基于以下两个原因,建议准备 2 倍于正常活体成像和示踪实验
单细胞悬液,将细胞悬液注射入裸鼠(或其他免疫缺陷类小鼠)皮下,构建荷瘤小鼠。待肿瘤直径达到1cm时,在无菌条件下取出肿瘤,将肿瘤剪成1mm左右小的肿瘤微粒,通过手术的方法将小肿瘤块植入肝脏。可借助小动物活体成像、MRI等影像设备观察肿瘤生长情况。 二、人脑神经胶质瘤原位移植模型 动物麻醉后,固定在脑立体定位仪上,术区常规消毒,将头皮做纵向切口,暴露颅骨,用牙科钻在颅骨上钻一小孔,确定注射位置,将预先处理好的细胞悬液注入脑内,注射完毕后留针3min,牙托粉封闭骨孔,缝合切口。 三
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