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革兰氏染液

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  • 上海一研
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  • 2025年12月06日
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    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      100T

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    中文名称:革兰氏染液
    英文名称:

    产品规格:100T
    发货周期:1~3天
    革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。首先,细菌经初染剂结晶紫初染成蓝紫色,再加媒染剂与结晶紫结合成结晶紫-碘的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力。
    革兰氏阳性细菌(G+)的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,壁厚,类脂含量低,用脱色剂脱色时细胞壁脱水,使肽聚糖层的网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。而革兰氏阴性菌(G-)细胞壁类脂含量较多,肽聚糖层较薄且肽聚糖为平面片层结构,易被脱色剂溶解,使细胞壁通透性增高,结合的染料复合物容易泄漏,细菌被脱色为无色,再经复染液复染为红色。
    1. 将涂片在火焰上固定,滴加R1 初染剂染1 分钟,水洗。
    2. 滴加R2 媒染剂作用1 分钟后水洗。
    3. 滴加R3 脱色剂,此时应将玻片不时摇动,直至无紫色脱落为止,染30 秒钟,水洗,水流不可太大。
    4. 滴加R4 复染液染色30 秒,水洗,待干,镜检。
    染色结果:革兰氏阳性菌为紫色,革兰氏阴性菌为红色。


    产品细节图片1
    革兰氏染液使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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    真核翻译起始因子3A抗体英文全称Phosphorylation Connexin 43英文简称PCX43检测范围5429nmol/L-20ng/ml
    免疫球蛋白超家族成员12抗体英文全称Augmenter of Liver Regeneration英文简称ALR检测范围5430nmol/L-800pg/ml
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    IQCJ蛋白抗体英文全称5-Hydroxytryptamine 2A英文简称5-HT2A检测范围5432nmol/L-320ng/ml
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