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25
- 英文名：
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
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低温
- 规格：
50次
中文名称：Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种采用Annexin V-Alexa Fluor 488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色， 因此通常将Annexin V与PI配合染色， 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
操作步骤：
1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。
Annexin V-Alexa Fluor 488 PI双染流式分析图谱
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI双染流式分析图谱
储存条件：2～8℃，避光保存使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
芳基酸酯酶A抗体英文全称7-Dehydrocholesterol Reductase英文简称DHCR7检测范围790nmol/L-10ng/mL
植物延长蛋白（拟南芥）英文全称ECMA-Ab英文简称ECMA-Ab检测范围791nmol/L-800pg/ml
拟南芥ACA11抗体英文全称Kidney injury molecule 英文简称Kim检测范围792nmol/L-4000pg/ml
AHA3抗体（拟南芥）英文全称Clostridium difficiletoxin toxin英文简称CDT检测范围793nmol/L-1200ng/L
A-Raf抗体英文全称homeobox D8 antibody英文简称HOXD8-Ab检测范围794nmol/L-32ng/mL
红细胞腺苷脱氨酶3抗体英文全称Orexins A英文简称OXA检测范围795nmol/L-1000pg/mL
星形胶质细胞抗体英文全称HPV-IgG英文简称HPV-IgG检测范围796nmol/L-640IU/mL
醛缩酶A抗体英文全称Macroprolactin英文简称Macroprolactin检测范围797nmol/L-240pg/mL
雄激素结合蛋白抗体英文全称AFB1-DNA英文简称AFB1-DNA检测范围798nmol/L-2400pg/mL
肝再生增强因子抗体英文全称Alpha-fetoprotein 1英文简称AFP1检测范围799nmol/L-16ng/mL
APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体英文全称Recoverin英文简称Recoverin检测范围800nmol/L-100ng/ml
甲胎蛋白单克隆抗体（包被）英文全称Interleukin 33 Receptor英文简称IL-33R检测范围801nmol/L-120pg/mL
甲胎蛋白单克隆抗体(检测)英文全称NSMCE2英文简称NSMCE2检测范围802nmol/L-480pg/mL
ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体英文全称Haemophilus influenzae type b antibody英文简称Hib-Ab检测范围803nmol/L-20μg/ml
吸引素抗体英文全称Anti-myeloperoxidase deficiency Antibody英文简称Anti-Mpo检测范围804nmol/L-24ng/mL
OF发酵管20支OF发酵管BR
ONPG发酵管20支ONPG发酵管BR
肝素抗凝管5毫升肝素抗凝管
10毫升
Rambach琼脂250克Rambach琼脂金黄色葡萄球菌快速显色分离培养
耶尔森氏菌显色培养基250克耶尔森氏菌显色培养基耶尔森氏菌快速显色分离培养
Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒Moschus麝香PCR鉴定试剂盒 中文名称 粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体别 名 Adhesion molecule with Ig like domain 1; ali2; Alivin 2; AMIGO 1; AMIGO; AMIGO protein; Amphoterin induced gene and ORF (Amigo); Amphoterin induced gene and ORF; Amphoterin induced protein 1; KIAA1163; AMGO1_HUMAN.研究领域 神经生物学 信号转导 细胞粘附分子蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AMIGO1
Herba lycopodii伸筋草PCR鉴定试剂盒 中文名称 突触融合结合蛋白6抗体别 名 Amisyn; HSPC156; STXB6_HUMAN; STXBP6; Syntaxin binding protein 6; Syntaxin-binding protein 6.研究领域 神经生物学 细胞粘附分子 细胞外基质蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Amisyn
Rhizoma zingiberis recens生姜PCR鉴定试剂盒 中文名称 星形肌动蛋白抗体别 名 Astn2; Astn-2; Astn 2; ASTN2_HUMAN; Astrotactin 2; Astrotactin2; Astrotactin-2; bA67K19.1; KIAA0634.研究领域 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 143kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASTN2
Rhizoma cimicifugae升麻PCR鉴定试剂盒 中文名称 精氨酸酶1抗体别 名 ARG 1; ARG1; ARGI1_HUMAN; Arginase1; Arginase liver; Arginase type I; Arginase I; ArginaseI; Arginase-1; Arginase1; Liver type arginase; Liver-type arginase; Type I arginase.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导蛋白分子量 predicted molecular weight: 35kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Arginase 1
Rhizoma acori tatarinowii石菖蒲PCR鉴定试剂盒 中文名称 腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体别 名 adenylate kinase domain containing 1; adenylate kinase domain containing 2; Adenylate kinase domain-containing protein 1; Adenylate kinase domain-containing protein 2; AKD1; AKD1_HUMAN; AKD2 ; C6orf224; chromosome 6 open reading frame 199; chromosome 6 open reading frame 224 Gm234; Gm7127; RP1-70A9.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 221kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKD1
英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种采用Annexin V-Alexa Fluor 488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色， 因此通常将Annexin V与PI配合染色， 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
操作步骤：
1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。
Annexin V-Alexa Fluor 488 PI双染流式分析图谱
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI双染流式分析图谱
储存条件：2～8℃，避光保存使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
芳基酸酯酶A抗体英文全称7-Dehydrocholesterol Reductase英文简称DHCR7检测范围790nmol/L-10ng/mL
植物延长蛋白（拟南芥）英文全称ECMA-Ab英文简称ECMA-Ab检测范围791nmol/L-800pg/ml
拟南芥ACA11抗体英文全称Kidney injury molecule 英文简称Kim检测范围792nmol/L-4000pg/ml
AHA3抗体（拟南芥）英文全称Clostridium difficiletoxin toxin英文简称CDT检测范围793nmol/L-1200ng/L
A-Raf抗体英文全称homeobox D8 antibody英文简称HOXD8-Ab检测范围794nmol/L-32ng/mL
红细胞腺苷脱氨酶3抗体英文全称Orexins A英文简称OXA检测范围795nmol/L-1000pg/mL
星形胶质细胞抗体英文全称HPV-IgG英文简称HPV-IgG检测范围796nmol/L-640IU/mL
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雄激素结合蛋白抗体英文全称AFB1-DNA英文简称AFB1-DNA检测范围798nmol/L-2400pg/mL
肝再生增强因子抗体英文全称Alpha-fetoprotein 1英文简称AFP1检测范围799nmol/L-16ng/mL
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甲胎蛋白单克隆抗体(检测)英文全称NSMCE2英文简称NSMCE2检测范围802nmol/L-480pg/mL
ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体英文全称Haemophilus influenzae type b antibody英文简称Hib-Ab检测范围803nmol/L-20μg/ml
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10毫升
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Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒Moschus麝香PCR鉴定试剂盒 中文名称 粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体别 名 Adhesion molecule with Ig like domain 1; ali2; Alivin 2; AMIGO 1; AMIGO; AMIGO protein; Amphoterin induced gene and ORF (Amigo); Amphoterin induced gene and ORF; Amphoterin induced protein 1; KIAA1163; AMGO1_HUMAN.研究领域 神经生物学 信号转导 细胞粘附分子蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AMIGO1
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Rhizoma cimicifugae升麻PCR鉴定试剂盒 中文名称 精氨酸酶1抗体别 名 ARG 1; ARG1; ARGI1_HUMAN; Arginase1; Arginase liver; Arginase type I; Arginase I; ArginaseI; Arginase-1; Arginase1; Liver type arginase; Liver-type arginase; Type I arginase.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导蛋白分子量 predicted molecular weight: 35kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Arginase 1
Rhizoma acori tatarinowii石菖蒲PCR鉴定试剂盒 中文名称 腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体别 名 adenylate kinase domain containing 1; adenylate kinase domain containing 2; Adenylate kinase domain-containing protein 1; Adenylate kinase domain-containing protein 2; AKD1; AKD1_HUMAN; AKD2 ; C6orf224; chromosome 6 open reading frame 199; chromosome 6 open reading frame 224 Gm234; Gm7127; RP1-70A9.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 221kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKD1
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