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50
- 英文名：
Collagenase I
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详见说明书
- 供应商：
上海一研
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低温
- 规格：
100mg
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中文名称：胶原酶I型
英文名称：Collagenase I
产品规格：100mg
发货周期：1～3天
本品为I型胶原酶，≥250 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。
本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。
胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：
1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件：4℃，有效期两年
胶原酶I型使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
HAUS5蛋白抗体英文全称Peptidyl Arginine Deiminase Type英文简称PADI检测范围4855nmol/L-100ng/mL
HMG盒区内含蛋白1抗体英文全称Non phosphorylation pyruvate dehydrogenase英文简称NPPDH检测范围4856nmol/L-100U/L
血红蛋白theta亚型1抗体英文全称Acyl-CoA Binding Protein英文简称ACBP检测范围4857nmol/L-4000pg/ml
hbs1样蛋白抗体英文全称nuclear protein英文简称NP检测范围4858nmol/L-200ng/ml
缩素复合物亚型蛋白3抗体英文全称NK3 Homeobox Protein 1英文简称NKX3-1检测范围4859nmol/L-20ng/ml
RNA结合蛋白39抗体英文全称cyclooxygenase-11英文简称COX-11检测范围4860nmol/L-1000pg/mL
全细胞色素C合成酶抗体英文全称Chromobox Homolog 3英文简称CBX3检测范围4861nmol/L-10ng/mL
血红素转运蛋白1抗体英文全称Prostate specific membrane antigen英文简称PSMA检测范围4862nmol/L-8ng/mL
血红素转运蛋白5抗体英文全称Inosine 5'-Monophosphate Dehydrogenase 1英文简称IMPDH1检测范围4863nmol/L-48ng/mL
造血细胞信号转导蛋白抗体英文全称Inosine 5'-Monophosphate Dehydrogenase 1英文简称IMPDH2检测范围4864nmol/L-32ng/mL
卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体英文全称Guanosine diphosphate英文简称GDP检测范围4865nmol/L-80pg/ml
His 结构域内含酪氨酸磷酸酶蛋白抗体英文全称Guanosine diphosphate英文简称GMP检测范围4866nmol/L-48pg/ml
多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗体英文全称Pyruvate Dehydrogenase Beta英文简称PDHb检测范围4867nmol/L-20ng/mL
肌球蛋白重链抗体英文全称Filaggrin英文简称FLG检测范围4868nmol/L-20ng/mL
HECT E3泛素链接酶抗体英文全称Involucrin英文简称INV检测范围4869nmol/L-8ng/mL
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本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。
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1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
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1． 微量试剂取用前请离心集液。
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3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
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6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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