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- 百奥莱博
- JN0076-LRE
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
405
- 英文名：
Klenow Fragment(3'→5' exo-)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
250U
特别提示：包括Klenow片段在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Klenow片段
英文名称：Klenow Fragment(3"→5" exo-)
产品货号：JN0076
产品规格：250U
本品是DNA聚合酶I的N末端截短物，它保留了DNA聚合酶活性，但缺乏单链特异的3"-5"外切酶活性以及双链特异性5"-3"外切酶活性。常用来补齐双链DNA的3"端凹陷，或应用于随机引物标记及测序等分子生物学实验。
产品用途：
1、用随机引物制备探针；
2、随机引物法标记；
3、cDNA第二条链的合成。
使用建议：Klenow Fragment（3´→5´exo-）因去除了 3´→5´核酸外切酶的活性，故不适用于生成平末端的反应。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
活性定义：在37℃条件下，30min内使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
热失活：72℃，20分钟。
储存条件：-20℃
我公司销售的Klenow片段现货供应，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
的dNTP都可使用于探针标记，但通常使用[α-32 P]-dNTP。 2、DNA酶Ⅰ的活性不同，所得到的探针比活性也不同，DNA酶Ⅰ活性高，则所得探针比活性高，但长度比较短。 2. 随机引物合成法 随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是：(1)Klenow片段没有5'→3'外切
随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火)，以提供3， 羟基端，在无5， →3， 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下，在引物的3， 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时，即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列，引物与模板的结合以一种随机的方式发生，标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
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