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- 详细信息
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53
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详见说明书
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上海一研
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低温
- 规格：
500T
中文名称：PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒
英文名称：
产品规格：500T
发货周期：1～3天
PKH67/PI 双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料PKH67和PI对细胞进行染色，利用PKH67标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色和绿色，从而检测细胞毒性作用。
根据不同的实验方案设计，可以用来检测化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T 细胞或NK 细胞介导的细胞毒作用。
荧光染料PKH67是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。
在细胞分裂增殖过程中，PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次(1/2的荧光强度)，二次(1/4的荧光强度)，三次(1/8的荧光强度)，以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测，PKH67 还可以用于细胞的体外盒体内示踪，标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH67 毒性较小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH67/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。
PKH67标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=490 nm,λem=502 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为502nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。
PKH67标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
储存条件：-20℃避光保存。
PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体英文全称inositol-1-phosphate英文简称Ins 1-P检测范围4285nmol/L-800pg/mL
γ-衔接蛋白相关蛋白2抗体英文全称phosphorylated alpha；beta hydrolase domain contains protein 5英文简称p-ABHD5检测范围4286nmol/L-8ng/mL
γ-衔接蛋白相关蛋白3抗体英文全称Phosphorylation Perilipin英文简称p-PLIN检测范围4287nmol/L-80ng/mL
配子生成素抗体英文全称complement factor D英文简称CFD检测范围4288nmol/L-8ng/mL
γ谷氨酰转肽酶2重链抗体英文全称Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A英文简称CDKN1A检测范围4289nmol/L-8ng/ml
γ-谷氨酰转肽酶5重链抗体英文全称Complement 3英文简称C3检测范围4290nmol/L-160μg/mL
γ-谷氨酰转肽酶6抗体英文全称Ovalbumin IgG1 antibody英文简称OVA-IgG1 Ab检测范围4291nmol/L-1000ng/mL
γ-谷氨酰转肽酶7重链抗体英文全称Ovalbumin IgG2a antibody英文简称OVA-IgG2a Ab检测范围4292nmol/L-640ng/mL
生长激素2/胎盘特异性生长激素抗体英文全称ERp57英文简称ERp57检测范围4293nmol/L-320ng/mL
高尔基体相关蛋白GM130抗体英文全称BPDE-DNA英文简称BPDE-DNA检测范围4294nmol/L-4000pg/ml
葡糖淀粉酶抗体英文全称Soluble β-amyloid英文简称sAβ检测范围4295nmol/L-2000pg/mL
G蛋白γ11/Gγ11 抗体英文全称Insoluble β-amyloid英文简称isAβ检测范围4296nmol/L-800pg/mL
胃泌素抑制肽受体抗体英文全称enterovirus-71 IgG英文简称EV71-IgG检测范围4297nmol/L-800ng/ml
生长因子受体结合适应蛋白抗体英文全称protein tyrosine phosphatase antibody英文简称IA-2A检测范围4298nmol/L-200ng/mL
GARNL3蛋白抗体英文全称anti-double stranded DNA IgG英文简称dsDNA-IgG检测范围4299nmol/L-20ng/mL
红细胞裂解液C型（核酸纯化） SLITRK4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
白细胞裂解液RPS6KA1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
微型离心管专用研磨杵 (无离心管) PLTP rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
微型离心管专用研磨杵 (有离心管) PFKL rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
动物DNAoutMSMB rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒人膀胱基质成纤维细胞 英文名称：HBdSF请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人前列腺微血管内皮细胞 英文名称：HPrMEC请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人前列腺上皮细胞 英文名称：HPEpiC请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人膀胱癌细胞，HT-1376细胞 500 ml请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人膀胱癌细胞，RT112细胞 特价促销 5 ml请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
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人膀胱移行细胞癌，BC-3C细胞 特价促销 2500 tests/96 well plate请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
英文名称：
产品规格：500T
发货周期：1～3天
PKH67/PI 双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料PKH67和PI对细胞进行染色，利用PKH67标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色和绿色，从而检测细胞毒性作用。
根据不同的实验方案设计，可以用来检测化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T 细胞或NK 细胞介导的细胞毒作用。
荧光染料PKH67是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。
在细胞分裂增殖过程中，PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次(1/2的荧光强度)，二次(1/4的荧光强度)，三次(1/8的荧光强度)，以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测，PKH67 还可以用于细胞的体外盒体内示踪，标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH67 毒性较小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH67/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。
PKH67标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=490 nm,λem=502 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为502nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。
PKH67标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
储存条件：-20℃避光保存。
PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体英文全称inositol-1-phosphate英文简称Ins 1-P检测范围4285nmol/L-800pg/mL
γ-衔接蛋白相关蛋白2抗体英文全称phosphorylated alpha；beta hydrolase domain contains protein 5英文简称p-ABHD5检测范围4286nmol/L-8ng/mL
γ-衔接蛋白相关蛋白3抗体英文全称Phosphorylation Perilipin英文简称p-PLIN检测范围4287nmol/L-80ng/mL
配子生成素抗体英文全称complement factor D英文简称CFD检测范围4288nmol/L-8ng/mL
γ谷氨酰转肽酶2重链抗体英文全称Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A英文简称CDKN1A检测范围4289nmol/L-8ng/ml
γ-谷氨酰转肽酶5重链抗体英文全称Complement 3英文简称C3检测范围4290nmol/L-160μg/mL
γ-谷氨酰转肽酶6抗体英文全称Ovalbumin IgG1 antibody英文简称OVA-IgG1 Ab检测范围4291nmol/L-1000ng/mL
γ-谷氨酰转肽酶7重链抗体英文全称Ovalbumin IgG2a antibody英文简称OVA-IgG2a Ab检测范围4292nmol/L-640ng/mL
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葡糖淀粉酶抗体英文全称Soluble β-amyloid英文简称sAβ检测范围4295nmol/L-2000pg/mL
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胃泌素抑制肽受体抗体英文全称enterovirus-71 IgG英文简称EV71-IgG检测范围4297nmol/L-800ng/ml
生长因子受体结合适应蛋白抗体英文全称protein tyrosine phosphatase antibody英文简称IA-2A检测范围4298nmol/L-200ng/mL
GARNL3蛋白抗体英文全称anti-double stranded DNA IgG英文简称dsDNA-IgG检测范围4299nmol/L-20ng/mL
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白细胞裂解液RPS6KA1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
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微型离心管专用研磨杵 (有离心管) PFKL rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
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