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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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100ml
特别提示:包括Western及IP细胞裂解液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Western及IP细胞裂解液
产品货号:GL1467
产品规格:100ml
用途:
温和裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀,免疫共沉淀等。对于普通的Western、IP或co-IP,我们推荐使用本裂解液,
注意事项:
主要由Tris 、NaCl、Triton X-100组成。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:-20℃,12个月
我公司销售的Western及IP细胞裂解液北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11:使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子,而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行,在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白,从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白,然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析,从而确认互作
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
(100μM)15高糖+D药物(100μM)+B药物(1mM) 免疫沉淀过程实验试剂:A抗体(santa cruz,IP浓度 1:100);B抗体(santa cruz,IP浓度 1:100);Protein A+G Agarose(上海维景生物)蛋白样品的准备:1).对于10厘米细胞培养皿中的贴壁细胞,吸除细胞培养液,PBS洗涤一次,然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。可以使用嘉美生物Western及IP细胞裂解液或各种RIPA裂解液等进行细胞的裂解。 2).对于组织样品参考贴壁细胞使用
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