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- 英文名：
MTT
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详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
250mg
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中文名称：MTT(噻唑兰)
英文名称：MTT
产品规格：250mg
发货周期：1～3天
噻唑兰（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也称作溴化噻唑蓝四氮唑，是一种黄色染料，已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法，用来检测细胞的活力，细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于：MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶，而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来，酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比，用以评估细胞存活状况。
MTT也可用作免疫组化/细胞化学染色试剂，也可用来检测NAD。MTT被快速还原成甲臜后，能够螯合镍，铜和钴。钴螯合物可参与机体氧化系统。
CAS：298-93-1
分子式：C18H16N5SBr
外观：淡黄色至橙色粉末
分子量：414.3
纯度：≥98%
熔点：187℃
溶解性：溶于水，甲醇
储存条件：4℃
MTT(噻唑兰)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
脱氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗体英文全称Phaeophorbide A英文简称Phaeophorbide A检测范围3220nmol/L-320ng/mL
多巴受体D5抗体英文全称Neoxanthin英文简称N检测范围3221nmol/L-20ug/ml
桥粒斑蛋白1抗体英文全称Violaxanthin英文简称V检测范围3222nmol/L-24ug/ml
桥粒斑蛋白2抗体英文全称EGases英文简称EGases检测范围3223nmol/L-240IU/mL
丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体英文全称NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase英文简称NADP-GAPDH检测范围3224nmol/L-80μg/ml
解旋酶DEAD5抗体英文全称Trehalose-6-phosphate英文简称T6P检测范围3225nmol/L-120pg/ml
死亡相关蛋白5抗体英文全称Glucose-1-Phosphate英文简称G1P检测范围3226nmol/L-80ng/mL
膀胱癌缺失基因1英文全称Glutataione Enzym英文简称GSHE检测范围3227nmol/L-1000U/mL
磷酸化膀胱癌缺失基因1抗体英文全称Phosphoglucomutase英文简称PGM检测范围3228nmol/L-240IU/ml
D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体英文全称glutamine tRNA synthetase英文简称Glu-tRNAs检测范围3229nmol/L-240U/L
磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体英文全称5-aminolevulinic acid synthetase英文简称5-ALAase检测范围3230nmol/L-80U/L
磷酸化双皮质素抗体英文全称Jasmonate英文简称Jasmonate检测范围3231nmol/L-480ng/mL
磷酸化Disabled 1抗体英文全称Brassinolide英文简称BR检测范围3232nmol/L-500pmol/L
多巴、cAMP调节磷蛋白抗体英文全称Pyruvate decarboxylase英文简称PDC检测范围3233nmol/L-40IU/L
磷酸化多巴/cAMP调节神经磷蛋白抗体英文全称Total Sugar英文简称TS检测范围3234nmol/L-200ug/ml
MTT(噻唑兰)Catechu儿茶LAMP鉴定试剂盒中文名称 趋化素样因子超家族成员8抗体别 名 Cklfsf8; Chemokine like factor super family member 8; CKLF like MARVEL transmembrane domain containing 8; CKLFSF8 V2; CMTM 8; CMTM-8; CMTM8; CKLF8_HUMAN.研究领域 细胞生物 信号转导 生长因子和激素 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from hu CKLFH8/CMTM8
Rhizoma pinelliae preparatum法半夏LAMP鉴定试剂盒 中文名称 趋化素样因子超家族成员1抗体别 名 chemokine like factor super family 1; chemokine like factor superfamily 1; chemokine like factor superfamily member 1; CKLF like MARVEL transmembrane domain containing 1; CKLF like MARVEL transmembrane domain containing protein 1; CKLFH1; CKLFH1a; CKLFSF1; CKLF1_HUMAN.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 19kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CKLFH1/CMTM1
Folium sennae 番泻叶LAMP鉴定试剂盒 中文名称 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN6抗体别 名 Ceroid lipofuscinosis, neuronal 6, late infantile, variant; CLN6 protein; FLJ20561; Nclf; Protein CLN6; CLN6_HUMAN.研究领域 细胞生物 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CLN6
Radix saposhnikoviae防风LAMP鉴定试剂盒 中文名称 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体别 名 Batten disease protein; Battenin; BTS; Ceroid lipofuscinosis neuronal 3; Ceroid lipofuscinosis neuronal 3 juvenile (Batten Spielmeyer Vogt disease); Ceroid lipofuscinosis neuronal 3 juvenile; CLN 3; MGC102840; Protein CLN3; CLN3_HUMAN.研究领域 细胞生物 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CLN3
Radix stephaniae tetrandrae防已LAMP鉴定试剂盒 中文名称 趋化素样因子超家族成员3抗体别 名 BNAS2; Chemokine like factor super family 3; Chemokine like factor superfamily member 3; CKLF like MARVEL transmembrane domain containing 3; CKLF like MARVEL transmembrane domain containing protein 3; CKLFSF3; CMTM 3; MGC51956; AI413895; FLJ31762; 9430096L06Rik; CKLF3_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Hu CKLFH3/CMTM3
fms样酪氨酸激酶1(phospho Tyr1213) 多克隆抗体Flt-1 (phospho Tyr1213) Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
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中文名称：MTT(噻唑兰)
英文名称：MTT
产品规格：250mg
发货周期：1～3天
噻唑兰（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也称作溴化噻唑蓝四氮唑，是一种黄色染料，已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法，用来检测细胞的活力，细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于：MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶，而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来，酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比，用以评估细胞存活状况。
MTT也可用作免疫组化/细胞化学染色试剂，也可用来检测NAD。MTT被快速还原成甲臜后，能够螯合镍，铜和钴。钴螯合物可参与机体氧化系统。
CAS：298-93-1
分子式：C18H16N5SBr
外观：淡黄色至橙色粉末
分子量：414.3
纯度：≥98%
熔点：187℃
溶解性：溶于水，甲醇
储存条件：4℃
MTT(噻唑兰)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
脱氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗体英文全称Phaeophorbide A英文简称Phaeophorbide A检测范围3220nmol/L-320ng/mL
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桥粒斑蛋白1抗体英文全称Violaxanthin英文简称V检测范围3222nmol/L-24ug/ml
桥粒斑蛋白2抗体英文全称EGases英文简称EGases检测范围3223nmol/L-240IU/mL
丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体英文全称NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase英文简称NADP-GAPDH检测范围3224nmol/L-80μg/ml
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死亡相关蛋白5抗体英文全称Glucose-1-Phosphate英文简称G1P检测范围3226nmol/L-80ng/mL
膀胱癌缺失基因1英文全称Glutataione Enzym英文简称GSHE检测范围3227nmol/L-1000U/mL
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D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体英文全称glutamine tRNA synthetase英文简称Glu-tRNAs检测范围3229nmol/L-240U/L
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磷酸化Disabled 1抗体英文全称Brassinolide英文简称BR检测范围3232nmol/L-500pmol/L
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文献和实验相关实验
这段做MTT走了不少弯路，后来看了园子里有许许多多的建议和指导，再做时结果好了很多，心里很是感激，于是把众多的帖子进行了总结，希望对后来者有所帮助！同时感谢各位前辈的良帖！！MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满
MTT实验是检测细胞活力的实验方法，由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理：活细胞有琥珀酸脱氢酶，将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多，笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的，如果不知道细胞如何养，那就看看相关的文献方法。如果知道了细胞的名字，就可以上www.atcc.org检索细胞的培养信息，这个网站上的培养方法是标准培养方法。当然可以根据自己实验要求进行修改。由于细胞计数很繁琐，点板时的细胞
MTT 结果分析关于如何计算 IC501、改良寇式法：lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)Xm:lg 最大剂量I:lg(最大剂量/相临剂量)P: 阳性反应率之和Pm: 最大阳性反应率Pn: 最小阳性反应率举个例子：各药物浓度作用于某肿瘤细胞后所得 MTT 值如下公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率抑制率=1-加药组 OD 值/对照组 OD 值，如对于 100ug/ml 的药物，其抑制率=1-0.080/0.614=0.869，各组抑制率如下：代入计算公式：Pm
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