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Tuner(DE3)pLacI感受态细胞

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      Tuner(DE3)pLacI感受态细胞

    细胞名称:    Tuner(DE3)pLacI
    菌株类型:    E.coli
    培养基:    LB培养基
    生长条件:    37 ℃,  有氧
    基因型:    Tuner(DE3)pLacI感受态细胞基因型
    抗性:    氯霉素
    质粒转化条件:    42 ℃热激
    应     用:    蛋白表达

    诱导方法:    IPTG

    菌株特点:    
    Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株,这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。

    不像乳糖或者阿拉伯糖,IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下,目的蛋白可能会具有更的可溶性和生理活 性。

    Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节,具有严格的浓度依赖性。

    Tuner系列菌株是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

    pLacI基因型表明该菌株含有pACYC184质粒,该质粒含有Lac抑制子基因。

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    • 各种感受态细胞的区别、用途和特征

      摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+).

    • 各种感受态细胞的区别 用途 特征

      菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征

    • 如何阅读质粒图谱

      由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta ( DE3 ) pLysS 和 Rosetta ( DE3pLacI 中,稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株,能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶( lacY )突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞,从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度,表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平(通常

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