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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
50T|100T
中文名称：活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)
英文名称：Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
产品规格：50T|100T
发货周期：1～3天
细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象，二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时，细胞膜发生渗漏，细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程，起始阶段，染色质固缩、分离并沿核膜分布，细胞质亦发生固缩，但细胞膜依然完整未失去选择透性；在凋亡后期，核染色质断裂为大小不等的片断，与某些细胞器如线粒体一起聚集，为反折的细胞膜所包围，以后逐渐分离，形成凋亡小体。
本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为：DyeReagent 1 只进入活细胞，正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色；Dye Reagent 2 只能进入死细胞，将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同，可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。
操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液；
3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent（见注意事项2）；
4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀；
5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片，并用盖玻片盖上细胞（见注意事项3）；
6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察，分别对下列四类细胞进行计数，注意细胞总量须超过200 个。
储存：2-8℃，避光，有效期12个月。
活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
8号染色体开放阅读框33抗体英文全称hispidum英文简称hispidum检测范围1270nmol/L-
磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β/casein kinase IIβ抗体英文全称isozyme英文简称isozyme检测范围1271nmol/L-100mU/ml
9号染色体开放阅读框23抗体英文全称BLNK英文简称BLNK检测范围1272nmol/L-8ng/ml
9号染色体开放阅读框25抗体英文全称Ribonucleotide Reductase M2英文简称RRM2检测范围1273nmol/L-1000pg/ml
9号染色体开放阅读框30抗体英文全称Nerve growth factor receptor p75英文简称NGFRp75检测范围1274nmol/L-10ng/ml
9号染色体开放阅读框37抗体英文全称Vacuolating cytotoxin A IgG英文简称VacA-IgG检测范围1275nmol/L-200ng/ml
9号染色体开放阅读框40抗体英文全称protein kinase Cε英文简称PKCε检测范围1276nmol/L-20ng/ml
9号染色体开放阅读框41抗体英文全称viral haemorrhagic disease antibody英文简称VHD-Ab检测范围1277nmol/L-
9号染色体开放阅读框5抗体英文全称Catenin Beta 1英文简称CTNNb1检测范围1278nmol/L-1000pg/mL
9号染色体开放阅读框50抗体英文全称Nucleophosmin英文简称NPM检测范围1279nmol/L-1000pg/ml
9号染色体开放阅读框57抗体英文全称Cytotoxin-associated protein IgG antibody英文简称CagA-IgG检测范围1280nmol/L-
9号染色体开放阅读框6抗体英文全称retinoicacid-related orphan receptor variant 2英文简称RORC2检测范围1281nmol/L-20ng/ml
9号染色体开放阅读框62抗体英文全称Adipocyte Plasma Membrane Associated Protein英文简称APMAP检测范围1282nmol/L-10ng/ml
9号染色体开放阅读框64抗体英文全称Cytochrome P45019A1英文简称CYP19A1检测范围1283nmol/L-10ng/mL
9号染色体开放阅读框66抗体英文全称Angiotensin 1英文简称A1检测范围1284nmol/L-400pg/ml
DNA切除修复交叉互补基因1 单克隆抗体ERCC1 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
人类表皮生长因子受体2 单克隆抗体HER2 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
细胞角蛋白6 单克隆抗体Cytokeratin 6 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CK17 单克隆抗体CK17 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CD23 单克隆抗体CD23 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
胰岛素退化酶 单克隆抗体IDE Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)Cortex lycii地骨皮染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌膜蛋白11抗体（前梯度同源蛋白2）别 名 AG-3; AG3; Agr3; AGR3_HUMAN; Anterior gradient 3, xenopus, homolog of; Anterior gradient homolog 3; Anterior gradient homolog 3 (Xenopus laevis); anterior gradient protein 3; Anterior gradient protein 3 homolog; BCMP11; Breast cancer membrane protein 11; Gm888; hAG 3; hAG-3; HAG3; PDIA18; Protein disulfide isomerase family A member 18.研究领域 肿瘤 细胞表面分子 肿瘤细胞生物标志物蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCMP11/AGR3 (83-125aa)
Radix rehmanniae 地黄染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 酪氨酸蛋白激酶6/乳腺肿瘤激酶抗体别 名 Breast tumor kinase; Breast tumour kinase; Protein tyrosine kinase 6; PTK6; Tyrosine protein kinase BRK; PTK6_HUMAN.研究领域 肿瘤 信号转导 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 52 kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Brk/PTK6
Pheretima地龙染料法PCR鉴定试剂盒中文名称 乳腺癌抗雌激素耐药蛋白1别 名 Breast cancer anti estrogen resistance 1 protein; BCAR 1; Bcar1; BCAR1_HUMAN; Breast cancer anti estrogen resistance 1; Breast cancer anti-estrogen resistance protein 1; CAS; Cas scaffolding protein family member 1; Crk associated substrate; Crk associated substrate p130Cas; CRK-associated substrate; CRKAS; P130CAS.研究领域 肿瘤 信号转导 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 93kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCAR1
Radix sanguisorbae地榆染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌易感基因复合蛋白4抗体别 名 Brain and reproductive organ expressed (TNFRSF1A modulator); BRCA1/BRCA2 containing complex subunit 4; BRCA1/BRCA2 containing complex subunit 45; BRCC4; BRCC45; BRE_HUMAN.研究领域 肿瘤 免疫学 细胞凋亡 细胞周期蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 47kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BRCC4/BRCC45
Flos caryophylli丁香染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 纺锤体检查点蛋白抗体别 名 Bub1; BUB1 budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog; BUB1 budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog (yeast); BUB1_HUMAN; BUB1A; BUB1L; Budding uninhibited by benzimidazoles 1 (yeast homolog); Budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog; hBUB1; Mitotic checkpoint serine/threonine protein kinase BUB1; Mitotic checkpoint serine/threonine-protein kinase BUB1; Mitotic spindle checkpoint kinase; Putative serine/threonine protein kinase.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 细胞周期蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 122kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bub1
英文名称：Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
产品规格：50T|100T
发货周期：1～3天
细胞坏死和凋亡是两种截然不同的细胞学现象，二者发生的过程在形态学上有很大的区别。在细胞坏死时，细胞膜发生渗漏，细胞内容物包括细胞器以及染色质释放到胞外。而在细胞凋亡过程，起始阶段，染色质固缩、分离并沿核膜分布，细胞质亦发生固缩，但细胞膜依然完整未失去选择透性；在凋亡后期，核染色质断裂为大小不等的片断，与某些细胞器如线粒体一起聚集，为反折的细胞膜所包围，以后逐渐分离，形成凋亡小体。
本产品提供的染料可以分别对正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞的细胞核进行染色。其染色原理为：DyeReagent 1 只进入活细胞，正常的细胞核及处于凋亡早期的细胞核呈现绿色；Dye Reagent 2 只能进入死细胞，将死细胞以及凋亡晚期的细胞核染成橙色。因此通过在荧光显微镜下观察细胞显色和形态的不同，可以同时将正常细胞、坏死细胞、凋亡早期细胞和凋亡晚期细胞区分开来。
操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡；
2. 用PBS 洗涤细胞二次，并配成浓度为5×105~6×106cells/ml 细胞悬液；
3. 将Dye Reagent 1 和Dye Reagent 2 等体积混合形成Mixed Dyes Reagent（见注意事项2）；
4. 吸取25μL 的细胞悬液同1μL 的Mixed Dyes Reagent 轻轻混匀；
5. 吸取上述10μL 的混合液置于一洁净的载玻片，并用盖玻片盖上细胞（见注意事项3）；
6. 荧光显微镜510nm 激发波长观察，分别对下列四类细胞进行计数，注意细胞总量须超过200 个。
储存：2-8℃，避光，有效期12个月。
活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
8号染色体开放阅读框33抗体英文全称hispidum英文简称hispidum检测范围1270nmol/L-
磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β/casein kinase IIβ抗体英文全称isozyme英文简称isozyme检测范围1271nmol/L-100mU/ml
9号染色体开放阅读框23抗体英文全称BLNK英文简称BLNK检测范围1272nmol/L-8ng/ml
9号染色体开放阅读框25抗体英文全称Ribonucleotide Reductase M2英文简称RRM2检测范围1273nmol/L-1000pg/ml
9号染色体开放阅读框30抗体英文全称Nerve growth factor receptor p75英文简称NGFRp75检测范围1274nmol/L-10ng/ml
9号染色体开放阅读框37抗体英文全称Vacuolating cytotoxin A IgG英文简称VacA-IgG检测范围1275nmol/L-200ng/ml
9号染色体开放阅读框40抗体英文全称protein kinase Cε英文简称PKCε检测范围1276nmol/L-20ng/ml
9号染色体开放阅读框41抗体英文全称viral haemorrhagic disease antibody英文简称VHD-Ab检测范围1277nmol/L-
9号染色体开放阅读框5抗体英文全称Catenin Beta 1英文简称CTNNb1检测范围1278nmol/L-1000pg/mL
9号染色体开放阅读框50抗体英文全称Nucleophosmin英文简称NPM检测范围1279nmol/L-1000pg/ml
9号染色体开放阅读框57抗体英文全称Cytotoxin-associated protein IgG antibody英文简称CagA-IgG检测范围1280nmol/L-
9号染色体开放阅读框6抗体英文全称retinoicacid-related orphan receptor variant 2英文简称RORC2检测范围1281nmol/L-20ng/ml
9号染色体开放阅读框62抗体英文全称Adipocyte Plasma Membrane Associated Protein英文简称APMAP检测范围1282nmol/L-10ng/ml
9号染色体开放阅读框64抗体英文全称Cytochrome P45019A1英文简称CYP19A1检测范围1283nmol/L-10ng/mL
9号染色体开放阅读框66抗体英文全称Angiotensin 1英文简称A1检测范围1284nmol/L-400pg/ml
DNA切除修复交叉互补基因1 单克隆抗体ERCC1 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
人类表皮生长因子受体2 单克隆抗体HER2 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
细胞角蛋白6 单克隆抗体Cytokeratin 6 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CK17 单克隆抗体CK17 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
CD23 单克隆抗体CD23 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
胰岛素退化酶 单克隆抗体IDE Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)Cortex lycii地骨皮染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌膜蛋白11抗体（前梯度同源蛋白2）别 名 AG-3; AG3; Agr3; AGR3_HUMAN; Anterior gradient 3, xenopus, homolog of; Anterior gradient homolog 3; Anterior gradient homolog 3 (Xenopus laevis); anterior gradient protein 3; Anterior gradient protein 3 homolog; BCMP11; Breast cancer membrane protein 11; Gm888; hAG 3; hAG-3; HAG3; PDIA18; Protein disulfide isomerase family A member 18.研究领域 肿瘤 细胞表面分子 肿瘤细胞生物标志物蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCMP11/AGR3 (83-125aa)
Radix rehmanniae 地黄染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 酪氨酸蛋白激酶6/乳腺肿瘤激酶抗体别 名 Breast tumor kinase; Breast tumour kinase; Protein tyrosine kinase 6; PTK6; Tyrosine protein kinase BRK; PTK6_HUMAN.研究领域 肿瘤 信号转导 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 52 kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Brk/PTK6
Pheretima地龙染料法PCR鉴定试剂盒中文名称 乳腺癌抗雌激素耐药蛋白1别 名 Breast cancer anti estrogen resistance 1 protein; BCAR 1; Bcar1; BCAR1_HUMAN; Breast cancer anti estrogen resistance 1; Breast cancer anti-estrogen resistance protein 1; CAS; Cas scaffolding protein family member 1; Crk associated substrate; Crk associated substrate p130Cas; CRK-associated substrate; CRKAS; P130CAS.研究领域 肿瘤 信号转导 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 93kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCAR1
Radix sanguisorbae地榆染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌易感基因复合蛋白4抗体别 名 Brain and reproductive organ expressed (TNFRSF1A modulator); BRCA1/BRCA2 containing complex subunit 4; BRCA1/BRCA2 containing complex subunit 45; BRCC4; BRCC45; BRE_HUMAN.研究领域 肿瘤 免疫学 细胞凋亡 细胞周期蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 47kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BRCC4/BRCC45
Flos caryophylli丁香染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 纺锤体检查点蛋白抗体别 名 Bub1; BUB1 budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog; BUB1 budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog (yeast); BUB1_HUMAN; BUB1A; BUB1L; Budding uninhibited by benzimidazoles 1 (yeast homolog); Budding uninhibited by benzimidazoles 1 homolog; hBUB1; Mitotic checkpoint serine/threonine protein kinase BUB1; Mitotic checkpoint serine/threonine-protein kinase BUB1; Mitotic spindle checkpoint kinase; Putative serine/threonine protein kinase.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 细胞周期蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 122kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bub1
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文献和实验相关实验
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理：吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异，很易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡
的DNA片段。 对于晚期检测通常有以下方法： （1）TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) （2）LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) （3） Telemerase Detection (端粒酶检测) 形态学观察 普通光学显微镜观察；透射电子显微镜观察；荧光显微镜观察 普通光镜下观察： 用苏木素-伊红（HE）染色：细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色（凋亡细胞），正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色，坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失 Giemsa
下计数或使用流式细胞仪进行定量。信号强度比正常细胞高28倍，比坏死细胞高10倍。（2）特点：1.可测定早期凋亡细胞；2.可测定DNA发生断裂的时相； 3.地高辛/抗地高辛标记系统特异性好；4、适用于石蜡组织切片、冰冻组织切片，培养或分离的细胞的凋亡测定。（3）设备：荧光显微镜/流式细胞仪，离心机，染色缸，水浴。（4）步骤：将5x106 细胞加入1%副甲醛，固定15 min，离心，加70%乙醇，-20°C保存，洗涤，加TdT 2滴和50 ul 反应液。离心，洗涤，加100 ul荧光素标记的地高辛抗体，加
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