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- 国内
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
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大量
- 英文名：
BL21感受态细胞
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型: TKB1感受态细胞菌株基因型
抗性: 四环素
质粒转化条件: 42 ℃热激
应用: 毒性蛋白表达
诱导方法: IPTG
菌株特点:
作为E.coli B宿主菌，主要用来进行蛋白表达，细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶，能够有效避免目的蛋白的降解。
TKB1感受态细胞是BL21(DE3)衍生而来，含有酪氨酸激酶(Tyrosine Kinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞，简写为TKB1，带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝，该基因的启动子是LacUV5。
通过IPTG诱导表达的T7 RNA聚合酶，允许其下游目的蛋白表达，从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。
TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪氨酸激酶基因的质粒（pTK）。
TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin为复制起点的，包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面，那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。
从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白，能够用来筛选表达库，或者亲和纯化和蛋白印记酪氨酸磷酸化蛋白。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
Purification of dnEBNA-1/Soft from E. coli BL21 LysS
Inoculate 2ml of 5ml o/n culture of either p3133 (empty vector pET11a)or p3134 (dnEBNA-1/Soft)in E.coli BL21 LysS per 0.5L LB+ ampicillin (grow two 0.5L cultures of each) Incubate ~2hrs 37℃250rpm until OD600 = 0.4-0.6 Induce with 5ml 100mM ITPG
(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
