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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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17
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BL21(AI) BL21AI感受态细胞
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型: BL21-AI感受态细胞菌株基因型
抗 性: 四环素
质粒转化条件: 42 ℃热激
应 用: 蛋白表达, 毒性蛋白表达
诱导方法: L-阿拉伯糖
BL21(AI) BL21AI感受态细胞
菌株特点:
来源于BL21菌株。
是大肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r),在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过阿拉伯糖或者葡萄糖来调节,但菌株不含有lon蛋白酶。
菌株的大蛋白表达量往往低于BL21(DE3).
BL21-AI是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株。该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
Brian Caliendo (Voigt 实验室)报道过pCP20质粒比较难于转化到这个感受态细胞中,而pCP20转化到其他菌株中都很正常,但是菌体原因未知。
使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。注意:即使不加葡萄糖,BL21AI细胞的araBAD启动子下游的本底蛋白表达水平仍然很低,加入葡萄糖后能够进一步的降低本底蛋白的表达水平。
BL21-AI感受态细胞适用于任何以T7启动子为基础的表达载体,能够进行高水平的重组蛋白表达。
因为菌株体内的T7 RNA聚合酶水平能够进行有效调节,BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。从BL21-AI菌株中获得目的重组蛋白产量,和其他BL21菌株产量相当。
建议选择该菌株进行蛋白表达的条件如下:1. 你 在使用T7启动子载体(高拷贝或者低拷贝都可以)进行蛋白表达。2.使用其他BL21进行蛋白表达时,你观察到明显的细菌生长的抑制作用。3.你在表达一个已知的毒性蛋白。
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文献和实验(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
1:DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动
(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
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