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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
Herba schizonepetaeLAMP
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
50次
1. 适用标本类型:发病动物血液、空肠及小肠肠内容物及组织脏器(肠道组织、肠系膜及淋巴结等)和病毒培养液。
(1) 血清:用一次性注射器取静脉血2-3ml,转至5ml 的干燥管中,密闭送检。
(2) 肠内容物:无菌条件下取肠道内容物约1g 左右,置入1ml 含有1.0ml PBS(或生理盐水)的5ml 离心管中,立即送检。
(3) 组织脏器:取发病动物肠道组织及肠系膜淋巴结等组织约1g,置一1.5ml的洁净离心管中,密闭送检。
3.应避免标本间交叉污染。
4.标本收集后可立即检测;若不能立即检测,可置于2~8℃冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应冻存于-80℃以下,避免反复冻融。
订购信息:
| 产品名称 | 荆芥鉴定PCR试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Herba schizonepetaeLAMP |
| 规格 | 50次 |
保存: 负20度
有效期:一年
储存方式
避光-20℃以下保存,避免反复冻融,有效期12个月。
【适用仪器 】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
操作流程:
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
【检验方法】
1. 试剂准备(试剂准备区)
(1)从冰箱中取出试剂盒, 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。
(2)核算当次实验所需要的反应数(n),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。
n =阴性对照数(1T)+阳性对照数(1T)+误差预留量(1T)+样本数
3)在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照20 μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。
2.样本准备(样本处理区)
用QIAGEN、Roche公司RNA提取试剂盒提取RNA,具体操作按照其试剂盒说明书操作。
3.加样
在上述制备好的PCR反应样本管中分别加入处理好的待测标本RNA各5 μl、终体积25 μl/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器 上。阴性对照和阳性对照管则各加5 μL试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品,终体积为25 μl/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器 上。
4. PCR(PCR扩增区)
(1)取样本处理区准备好的PCR反应管,放置在实时荧光定量PCR仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。
(2)按下表设置仪器 核酸扩增相关参数进行PCR扩增。
技术特点:
1准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
5,6-二甲基-1-茚酮别 名 Beta Ala His dipeptidase; Carnosinase 1; Carnosinase1; Carnosine dipeptidase 1 (metallopeptidase M20 family); Carnosine dipeptidase 1; CN1; CNDP 1; CNDP dipeptidase 1; CPGL2; Glutamate carboxypeptidase like protein 2; Serum carnosinase.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导蛋白分子量 predicted molecular weight: 66kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CARM1产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500纯化方法 affinity purified by Protein A储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
芍药苷(标准品)别 名 Corticotropin releasing hormone receptor 2; Corticotropin-releasing factor receptor 2; Corticotropin-releasing hormone receptor 2; CRF 2; CRF 2R; CRF R2; CRF-R-2; CRF-R2; CRF2; CRF2R; CRFR 2; CRFR-2; CRFR2; CRFR2_HUMAN; CRH 2R; CRH R2; CRH-R-2; CRH-R2; CRH2R; CRHR 2; CRHR2.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 肿瘤细胞生物标志物蛋白分子量 predicted molecular weight: 30kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CYFRA21-1产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500纯化方法 affinity purified by Protein A储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
芍药苷(40%)别 名 non-muscle isoform; 18 kDa phosphoprotein; CFL 1; CFL; CFL1; COF1_HUMAN; Cofilin 1; Cofilin 1 non muscle; Cofilin; Cofilin non muscle isoform; Cofilin-1; p18 antibody.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CNDP1产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500纯化方法 affinity purified by Protein A储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
荆芥鉴定PCR试剂盒说明书3-Epimeliasenin B商陆皂苷甲(标准品) 分子式:C20H30O2 性状:Powder 纯度:%
2,3-Dihydro-3α-methoxynimbolide芍药内酯苷(标准品) 分子式:C29H44O10 性状:Powder 纯度:97.5%
28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-oic acid蛇床子素(标准品) 分子式:C27H38O4 性状:Powder 纯度:%
Dulcioic acid蛇床子素 分子式:C20H30O3 性状:Powder 纯度:98.5%
Hennadiol麝香酮(标准品) 分子式:C20H30O4 性状:Powder 纯度:97.5%
Mupinensisone升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷(标准品) 分子式:C19H28O3 性状:Powder 纯度:%
28-Deoxonimbolide升麻素(标准品) 分子式:C20H32O3 性状:Powder 纯度:%
Deacetylnimbin升麻素苷(标准品) 分子式:C18H26O3 性状:Powder 纯度:96.5%
Deacetylnimbinene升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷(标准品) 分子式:C20H34O3 性状:Powder 纯度:%
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
不彻底。 (4)反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。 (5)引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。 (6)使用PCR试剂盒时还应注意: ①是否严格按照说明书操作; ②试剂使用前是否充分混匀; ③试剂储存过久或不当而失效。 2. 扩增产物在凝胶中涂布或成片状 (1)酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。 (2)dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。 (3)MgCl2浓度过高。可适当降低
了一下,小提了质粒,做了酶切。(Kpn I和EcoR I是我的引物上带的位点) 酶切鉴定完了之后,从6号和7号克隆菌液中各取了1 ml送测序。结果6号有两个位点突变,还少了一小段,7号正确,算是运气比较好吧。接下来的操作,论坛上已经有很多大佬说过了,到了这一步之后,可能后面遇到的主要问题就是连接。Takara的T4连接酶说明书上说,载体与目的片段分别是0.03 pmol和0.3 pmol,也就是1:10。我一般就是按照说明书做的,效果也还行。但是,我做的片段都比较短,可能大片段的话要调整比例
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