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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Blunt/TA Ligase ProMix
- 保质期:
二年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50rxn/100rxn
产品概述
本产品是一种即用型2× 预混液,包含T4 DNA ligase、连接增强剂和专为平末端及T/A连接优化的缓冲液,提高了平末端连接及T/A克隆的转化效率,即使DNA量少且浓度低仍可进行克隆。试剂盒为即用型2× 预混液,只需加入准备好的平末端、T/A单碱基突出末端的DNA片段即可完成体系配制,25℃反应5 min即可转化至感受态细胞。该产品的连接产物无需稀释可直接转化至多种大肠杆菌感受态。
产品内容
组分 |
YB0032A | YB0032B |
| T4 Quick Ligation Mix | 250 μL | 500 μL |
产品优势
快速:5 min即可完成连接反应。
高连接效率:即使低浓度的粘性末端DNA片段,液可快速完成连接。
方便快捷:2×预混液包装,减少加样次数,使得克隆更为高效。
实验案例
1.高连接效率
以pT7BlueT载体及插入片段(1.0 kb)作为T/A连接底物, 以平末端pUC19载体及基因片段(0.5 kb)作为平末端连接底物用从A、B公司购入的同类产品、T4 Quick Ligation Mix、 Blunt/TA Ligase ProMix进行25℃,5 min快速连接,后转化到DH5α感受态细胞,在含有X-Gal、IPTG、Amp的L-琼脂平板上培养,形成单菌落,并进行菌落计数并计算转化效率。从结果中可看出钰博的T4 Quick Ligation Mix、 Blunt/TA Ligase ProMix具有较高的转化效率及连接效率。
应用范围
T/A克隆、平末端连接、dsDNA切刻修复。
产品存储
-20℃保存
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文献和实验•Streamlined sequence analysis Ligase-mediated(overnight)T4 DNA ligase Original TA Cloning® Kit •≥80% recombinants K2000-10K2030-10 •Blue/white color
,ccdB基因的表达蛋白,会破坏细菌的DNA gyrase,造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断,则ccdB基因表达受到阻碍,所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善,节省筛选的时间。Topo平端克隆 与Topo TA方法一样,操作简单快速。 平端PCR 克隆 方法(Zero Blunt PCR Cloning Kit) Zero Blunt PCR 克隆 乃利用传统T4连接酶方法,但载体
), use a higher concentration of and ligase (~10 X). Higher concentration of ligase (~5x) is also useful for sticky end ligation if ligation time is short. d) Only use phosphatase when strictly necessary. Fewer steps means less problem
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