- ¥300 - 1200
- 钰博生物
- YB018A
- 中国/上海
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
2× Robust SYBR Green qPCR ProMix
- 保质期：
二年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1mL/5mL
产品概述
2× Robust SYBR Green qPCR ProMix采用化学修饰的SsoRobust Taq DNA 聚合酶，配合独特的qPCR Buffer体系确保本产品可进行高灵敏的快速qPCR反应，qPCR反应时间可缩短至1小时以内。
该qPCR预混液中添加了延伸因子和特异性增强因子，使得本产品兼容各类样本的检测，包括含复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板。同时本产品还具有高扩增效率，高扩增特异性和宽广的可信区间等特点，在不影响PCR效果的前提下更快获得结果。适用于标准和快速PCR仪。
产品内容
| 组分 | YB018A | YBS018B |
| 2× Robust SYBR Green qPCR ProMix | 1 mL | 1 mL× 5 |
产品优势
快速、便捷：可使荧光定量PCR反应在1个小时内完成，适用于快速定量PCR仪；加入模板和特异性引物即可反应，操作简单便捷
可信区间宽广：该预混液在宽广的模板量区间具有卓越的线性关系，具有更低的检测限，更高的灵敏度
特异性高：严谨的SsoRobust Taq DNA 聚合酶，专利特异性增强因子，保证反应的特异性
适用性强：兼容复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板，大大提高了荧光定量PCR实验的成功率
实验案例
1. 宽广的可信区间
以TBP重组质粒为模板，进行7个10倍梯度稀释，第7个稀释梯度中重组质粒的拷贝数浓度约为10 copies/ 5 μL。使用Robust 预混液扩增U6基因，每孔模板使用量为5 μL，结果显示，并设置3个平行，本产品预混液可轻松检测出所有浓度的待测模板，定量区间宽广，且重复性好，结果可信度高。
2. 更高的特异性
以100 pg 茶叶Total RNA为模板，使用random primer合成1st strand cDNA之后，稀释10倍后作为模板，使用本产品预混液，与从A公司购入的同类产品，同时检测随机挑选的4个表达丰度较低的茶叶基因进行检测，结果显示，在低基因表达水平下，Robust qPCR预混液在均能够以高度的特异性扩增随机挑选的目标基因，而A公司产品则出现了非特异性扩增和起峰延迟现象。
3. 出色的兼容性
分别以人基因组DNA、粪便发酵液提取基因组DNA为模板，进行10倍稀释（10 ng、1 ng、0.1 ng、0.01 ng）；进行荧光定量PCR检测。使用2× Robust SYBR Green qPCR ProMix预混液及上一代产品2× SYBR Green qPCR ProMix（S013）扩增人源β-actin基因及及粪便中大肠杆菌基因，每孔模板使用量为5 μL，结果显示，本产品预混液及上一代产品均可检测出所有浓度的基因组待测模板，且具有较好的线性关系，但Robust 预混液具有更强的荧光信号及更优异的S型扩增曲线。
应用范围
荧光定量PCR、基因表达分析、肠道菌群检测、分子诊断、基因筛查
产品存储
-20℃保存
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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
the relative values for your gene of interest’s change in expression. SYBR qPCR Quick Protocol StandardsØ Dilute the cDNA ~4-fold (e.g. 21μl sample + 59μl H2 O = 80μl)Ø Pool an appropriate amount from each sample to create standard 1 (i.e. 30μl x
几个复孔，选择重复性好的 CT 值参与计算。 （2）CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法：从以下几个方面进行问题的排查：①加样准确度；②移液器吸取液体的准确度；③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样，减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系，并且增加模板的稀释梯度，大体积加样。如：原液 cDNA 添加 1μl，可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍，添加 5μl，使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
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